目的：研究软骨脱细胞基质支架材料的制备，及其体外复合同种异体脂肪源性干细胞构建软骨组织的技术方法。探讨软骨脱细胞基质作为支架材料在软骨组织工程中应用的可能性。方法：成年新西兰大白兔脂肪源性干细胞获得，培养，扩增。成年新西兰大白兔新鲜软骨分离获得，低温冻干12h，后经曲拉通、DNA酶、RNA酶等处理制备成为软骨脱细胞基质支架材料，紫外线灭菌后，终浓度为2×107/L的脂肪源性干细胞种植于软骨脱细胞基质中于软骨细胞方向诱导培养基中培养两周，构建软骨组织。新鲜制备的软骨脱细胞基质及构建的软骨组织分别行组织学、免疫组织化学及透射电镜检测。结果：组织学、透射电镜检测示实验制备的软骨脱细胞基质支架材料内无细胞结构存在，仅残留空白软骨陷窝。复合脂肪源性干细胞后并于软骨细胞方向诱导培养基中培养两周后，细胞向材料内部迁移，粘附，生长良好。免疫组织化学显示部分载体内细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。结论：软骨脱细胞基质可通过冻干，化学除垢剂，酶消化法制备。复合同种异体脂肪源性干细胞并于软骨细胞方向诱导培养基中培养可成功构建软骨组织。软骨脱细胞基质可作为支架材料应用于的软骨组织工程。