研究背景和目的:克罗恩病（Crohn’s disease,CD）是一种可以累及胃肠道任意部分的慢性炎症性疾病,是炎症性肠病（Inflammatory bowel disease,IBD）主要的临床形式之一。由于CD的确切病因尚不明确,临床上难以完全控制其发展,导致CD患者常发生肠纤维化等多种严重并发症,健康受到严重威胁。肠切除术、狭窄成形术和内镜下球囊扩张术是目前治疗CD相关狭窄和梗阻的有效方法,但不幸的是近70%-90%的患者在一年内复发。因此,寻找肠道纤维化的替代治疗策略迫在眉睫。二甲双胍已被证实对溃疡性结肠炎（UC）患者有可观的抗炎作用,但二甲双胍能否改善慢性结肠炎相关的肠纤维化及其可能的机制尚不清楚。研究方法:通过TNBS或DSS反复给药建立小鼠慢性结肠炎相关肠纤维化模型,造模的同时予二甲双胍（200mg/kg/d）灌胃,通过HE染色、羟脯氨酸测定、天狼星红染色、Western blot、免疫组化和免疫荧光实验来研究二甲双胍对TNBS或DSS诱导小鼠肠纤维化的预防作用。在已建立肠道纤维化的小鼠中予以二甲双胍（200mg/kg/d）灌胃,探索二甲双胍是否可以逆转已建立的肠纤维化。在细胞水平上,对TGF-β1处理的人结肠成纤维细胞系（CCD-18Co）及原代肠成纤维细胞进行二甲双胍（0.1或0.5mM）处理,通过Western blot、免疫荧光、EdU掺入及Transwell实验探索二甲双胍对成纤维细胞活化、胶原生成、增殖和迁移能力的影响。免疫共沉淀、siRNA、蛋白核浆分离实验和免疫荧光染色用于探索潜在的机制。研究结果:在TNBS和DSS两种不同的小鼠模型中,预防性施用二甲双胍减少了TNBS和DSS诱导的粘膜炎症及粘膜下层胶原纤维沉积,肌成纤维细胞数目减少,同时纤维化标志物及TGF-β1/Smad3通路关键蛋白表达降低。二甲双胍治疗逆转了小鼠已建立的由TNBS和DSS诱导的肠纤维化,表现为粘膜炎症、黏膜下层胶原纤维沉积、肌成纤维细胞减少,纤维化标志物及TGF-β1/Smad3通路关键蛋白表达降低。在细胞水平上,二甲双胍抑制了 TGF-β1诱导的人结肠成纤维细胞的活化、胶原生成、增殖和迁移能力。进一步的研究表明,二甲双胍通过抑制TβRI和Smad3的相互结合阻断TGF-β1/Smad3信号转导,最终抑制Smad3的磷酸化和核易位。同时我们还发现,二甲双胍的抗纤维化功能可能与AMPK活化无关。研究结论:二甲双胍在体内对TNBS或DSS诱导的肠道纤维化有保护作用,并抑制结肠成纤维细胞的活化和胶原合成,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3通路有关。这些发现为二甲双胍有望成为一种新的肠纤维化治疗药物的应用提供了证据。