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【目的】探讨循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）及其分子表达活性依赖性神经保护蛋白（Activity-dependent neuroprotective protein,ADNP）在非肌层浸润性膀胱癌（Non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC）患者中的预后作用,并评估检测CTCs计数的差相富集结合免疫染色-荧光原位杂交（Subtraction enrichment and immunostaining-fluorescence in situ hybridization,SE-iFISH）技术与检测CTCs中ADNP mRNA表达量的免疫磁珠-液滴数字PCR（Immunomagnetic beads-droplet digital polymerase chain reaction,IMBs-dd PCR）方法作为膀胱癌液体活检平台的可靠性。【方法】纳入74例经病理学确诊为膀胱癌的患者与22例非癌症人群,SE-iFISH技术计数CTCs,免疫磁珠-液滴数字PCR法检测CTCs中ADNP mRNA表达量。10名健康捐献者采集血液分别检测ADNP mRNA表达量及CTCs计数;12例泌尿系良性病变患者、15例既往膀胱癌手术的术后首次复发或转移膀胱癌患者及59例初诊膀胱癌患者在治疗前三天进行dd PCR检测ADNP mRNA表达量。对经尿道膀胱肿瘤二次电切手术的17例患者（确诊为高危NMIBC患者14例,3例为浸润深度不明的低中危患者）在术后三天同时检测CTCs计数和CTCs中ADNP mRNA表达水平。并通过免疫荧光染色方法探究ADNP蛋白在外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）和原代膀胱癌细胞上的表达情况。【结果】1.ADNP蛋白只在部分PBMCs中表达,而原代膀胱癌细胞均表达ADNP蛋白。免疫磁珠-dd PCR技术检测膀胱癌CTCs中ADNP mRNA表达具有很高的特异性和敏感性,可以在含10个原代膀胱癌细胞的外周血CTCs模型中检测ADNP mRNA的表达。SE-iFISH技术可以根据细胞大小、染色体倍性及肿瘤标志物将高度异质性的膀胱癌CTCs划分为不同的亚型。2.22例非癌症组与74例膀胱癌患者间的CTCs中ADNP mRNA表达量有显著差异,而非癌症组（n=22）中的10名健康捐献者与12例泌尿系良性病变患者间的CTCs中ADNP mRNA表达量无明显差异。膀胱癌亚组间CTCs中ADNP mRNA表达量无明显差异,并且术后复发患者与术后转移患者CTCs中ADNP mRNA的表达无明显差异。3.14例二次电切术后高危NMIBC患者与10名健康捐献者的CTCs中ADNP mRNA表达水平无明显差异。17例NMIBC患者二次电切术后ADNP mRNA表达量较术前（基线）下降24%,但无统计学差异。NMIBC患者（n=17）二次电切术后CTCs计数较健康捐献者（n=10）显著升高。外周血CTCs中ADNP mRNA表达水平与CTCs计数无相关性;各CTC亚型（大细胞型、小细胞型、三倍体、四倍体、多倍体）计数与CTCs中ADNP mRNA表达水平也无相关性。4.术前CTCs中ADNP mRNA表达水平可预测NMIBC患者复发进展预后,灵敏度为83.33%,特异度为73.58%。17例接受二次电切的NMIBC患者术后CTCs中ADNP mRNA表达水平较术前（基线）上升者5人,其中2人在随访期间复发;而表达水平较基线下降者12人,仅1人复发。14例二次电切术后随访期间未复发NMIBC患者总CTCs计数中大细胞型CTCs占比85.1%,小细胞型CTCs占14.9%;而在3例二次电切术后短期复发NMIBC患者中,小细胞型CTCs占比上升至71.4%。小细胞型CTCs计数（≥5 cells/6 ml）可预测高危NMIBC患者二次电切术后短期（三个月）复发。灵敏度为1.000,特异度为0.9286。但是未发现总CTCs计数、大细胞型CTCs计数与术后高危NMIBC患者预后相关。【结论】1.免疫磁珠-dd PCR技术为检测膀胱癌CTCs中ADNP mRNA表达提供了一个可靠的工具。SE-iFISH技术可以根据细胞大小、染色体倍性及肿瘤标志物将高度异质性的膀胱癌CTCs划分为不同的亚型。2.健康人群与膀胱癌患者的外周血CTCs中ADNP mRNA表达水平存在显著差异,术前CTCs中ADNP mRNA表达量是NMIBC患者预后因素,纵向监测膀胱癌患者CTCs中ADNP mRNA表达水平变化有评估治疗反应及预测预后的潜力。3.SE-iFISH检测外周血CTCs计数能显著区分膀胱癌患者与未患癌人群。小细胞型异倍体CTCs计数具有NMIBC术后短期复发预测能力。