目的:确定薄荷醇与氮酮联合应用对5-Fu的促透效果;探讨薄荷醇的经皮促透作用机制。方法:1薄荷醇与氮酮联用促透效果的评价采用两室扩散池体外实验装置,选取大鼠背部皮肤,以5-Fu作为模型药物,计算出其稳态流量及渗透系数,采用倍量法探讨不同浓度的薄荷醇与氮酮联用后的促透效果。2薄荷醇对皮肤微观结构的影响2.1光镜下观测皮肤的结构变化大鼠背部脱毛后,自然恢复一天,在体给药8h后处死,取用药部位皮肤,10%的甲醛溶液固定24h,常规石蜡切片,苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观测皮肤角质层及角质细胞间隙的变化。2.2扫描电镜观测皮肤结构的变化大鼠背部脱毛后,自然恢复一天,在体给药8h后处死,取用药部位皮肤,2.5%戊二醛固定24h,4℃磷酸盐缓冲液（pH7.4）中清洗,酒精梯度脱水,丙酮置换,最后放入中间液醋酸异戊酯中置换,CO₂临界点干燥,粘样,离子溅射镀膜,扫描电镜观察皮肤表面结构及角质层间隙的变化。2.3透射电镜观测皮肤结构的变化大鼠背部脱毛后,自然恢复一天,在体给药8h后处死,取用药部位皮肤,2.5%戊二醛固定,4℃磷酸盐缓冲液（pH7.4）中清洗,1%锇酸后固定,系列丙酮脱水,环氧树脂渗透与定向包埋,超薄切片,醋酸铀-枸橼酸铅染色,透射电镜观测皮肤角质层及皮肤间连接的变化。3 ATR-FTIR研究薄荷醇对皮肤脂质结构的影响选用大鼠皮肤,脱毛后,自然恢复一天,处死大鼠,取用皮肤,制备角质层,角质层放入薄荷醇溶液中37℃作用24h,取出角质层完全干燥,采用ATR-FTIR测定皮肤脂质的红外光谱。采用在人体皮肤给药8h后,清洗干净用药部位,直接测定用药部位的皮肤红外光谱。根据红外光谱图中脂质类物质的CH的振动位移的变化,探讨薄荷醇作用后,皮肤中脂质类物质的结构及构象的变化,以确定薄荷醇对皮肤角质层结构的影响。4薄荷醇对KC内Ca²⁺及Ca²⁺-ATP酶活性的影响4.1薄荷醇对KC内Ca²⁺的影响采用人KC无血清培养基进行原代培养,待90%以上细胞贴壁后,加入含有不同浓度的薄荷醇的培养基,利用流式细胞仪（FCM）结合Fluo-3/AM染色技术,半定量测定检测不同浓度薄荷醇与氮酮对KC内Ca²⁺浓度的影响。4.2薄荷醇对KC内Ca²⁺-ATP酶活性的影响采用无血清完全培养基原代培养人KC,待90%以上的细胞贴壁后,加入不同浓度的含药培养基,37℃培养30min后,离心,弃去上清液,加入一定量的生理盐水,急速冷冻解冻法破碎细胞,超微量Ca²⁺-ATP酶试剂盒,测定KC内Ca²⁺-ATP酶活性。结果:1薄荷醇与氮酮联用促透效果的评价研究发现薄荷醇在250mg/mL浓度时与氮酮在250μl/mL浓度时联用具有一定的协同作用,但在薄荷醇浓度≥500mg/mL与氮酮在浓度≥500μl/mL时联用并没有显示出协同作用。2薄荷醇对皮肤微观结构的影响2.1光镜下观测结果与空白组、溶剂组相比,薄荷醇组角质层疏松、脱落现象明显,薄荷醇组一些区域外层角质呈带状游离分布;角质细胞间隙变大;可知薄荷醇改变了皮肤角质层的结构,使角质层结构变的疏松、细胞间隙变大,从而降低了皮肤的屏障作用。2.2扫面电镜观测结果与空白组和溶剂组相比,薄荷醇作用后的表皮皱多折明显增,角质层脱落较明显,角质层明显疏松可见有孔穴样结构出现,表皮间裂隙增宽;薄荷醇组皮肤纵切面观测:表皮角质层结构明显松动,最外层角质层脱落明显,各层之间出现明显的间隙,表皮与真皮分离。薄荷醇影响了表皮结构,使表皮变得疏松,角质层有序致密结构破坏,降低了皮肤的屏障作用,使皮肤的通透性增加。2.3透射电镜观测结果与空白组和溶剂组相比,薄荷醇使角质层排列紊乱,层与层间的间隙变得更大,脂质正常的板层状膜状结构大部或全部消失,出现明显增厚的紊乱排列的中等致密的凝絮块状结构。各组角质层细胞间的连接无显著性差异;薄荷醇扰乱了角质层的有序排列,使角质层之间的空隙变大,结构疏松,皮肤通透性增加。3 ATR-FTIR研究薄荷醇对皮肤结构的影响经薄荷醇处理的人及大鼠表皮角质层中的脂质的CH2伸缩振动峰与正常组及溶剂组比较峰位向高峰位移动了3-4个波长,表明脂质的构象发生了改变,角质层中脂质排列的无序性增加。4薄荷醇对KC内Ca²⁺及Ca²⁺-ATP酶活性的影响4.1对KC内Ca²⁺的影响与空白组相比,不同浓度的薄荷醇作用的KC内Ca²⁺的荧光强度发生了右移,荧光强度增加;与溶剂组相比,薄荷醇组从25.00μmol/L开始对可显著增加KC内Ca²⁺的荧光强度（p<0.01）,25.00μmol/L的薄荷醇与50.00μmol/L的薄荷醇组荧光强度无显著性差异（p>0.05）;100μmol/L的薄荷醇与其他组相比有显著性差异（p<0.01）; 200μmol/L、400μmol/L的薄荷醇组无显著性差异（p>0.05）;细胞内Ca²⁺的荧光强度的改变不存在浓度依赖性。4.2对KC内Ca²⁺-ATP酶活性的影响与空白组相比,溶剂组及不同浓度的薄荷醇均降低了Ca²⁺-ATP酶的活性,在统计学上具有显著性差异（P<0.01）,表明0.1%DMSO及不同浓度的薄荷醇对Ca²⁺-ATP酶活性有不同程度的影响;与溶剂组相比,薄荷醇从25.00μmol/L到400μmol/L浓度对Ca²⁺-ATP酶活性有显著性差异（P<0.01, P<0.05）。结论:1薄荷醇在250mg/mL浓度时与氮酮在250μl/mL浓度时联用具有一定的协同作用,但在薄荷醇浓度≥500mg/mL与氮酮在浓度≥500μl/mL时联用并没有显示出协同作用。2薄荷醇对皮肤微观结构产生了影响,使表皮皱折明显增多,角质层排列紊乱,表皮间裂隙增宽,层与层间的间隙变得更大,角质层变的疏松,从表皮脱落.可知薄荷醇改变了角质层的有序致密结构,使表皮变得疏松,皮肤通透性增加。3薄荷醇改变了人及大鼠表皮角质层中的脂质的构象,使表皮角质层的有序致密结构发生了变化.4不同浓度的薄荷醇增加了KC内Ca²⁺的浓度,降低了Ca²⁺-ATP酶活性。