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背景干细胞已经运用于心肌梗死的临床与基础方面的研究,近年来,心干细胞的研究和发现为心肌梗死治疗开辟了一条展新的途径。心肌损伤坏死后,不能迅速有效产生大量的实质细胞,成纤维细胞快速增殖并分泌基质形成纤维瘢痕,限制损伤心肌组织再生,妨碍心干细胞向损伤坏死区迁移。因此,如何快速原位激活心干细胞、促进干细胞增殖、迁移和归巢,探寻心肌梗死治疗的分子靶点成为该领域的研究热点。目的探讨基质细胞衍生因子-1α(Stromal cell-derived factor-1α, SDF-1α)体外促进c-kit+心干细胞迁移和增殖作用。材料和方法从GenBank上检索SDF-1α基因序列,设计引物序列和病毒构建方案,交由生物公司构建含SDF-1α目的基因慢病毒(LV-SDF-1α)。酶消化法培养心肌成纤维细胞,不同浓度LV-SDF-1α转染心肌成纤维细胞,检测最佳转染MOI值；Dot-blot法检测转染LV-SDF-1α的心肌成纤维细胞在不同时间培养上清液中SDF-1α的表达,以转染空载体病毒(CON145)的心肌成纤维细胞培养上清为对照组。利用组织块培养法培养原代心组织细胞,培养至第20天,流式细胞仪分选得到纯化的c-kit+心干细胞；继续培养,镜下观察c-kit+心干细胞形态学变化；使用免疫荧光双标法技术,检测心肌早期标志物Nkx2.5和心肌细胞特异性标志cTnT (Cardiac troponin T)的表达。利用Transwell小室共培养转染慢病毒的心肌成纤维细胞与流式分选得来的c-kit+心干细胞,并利用AMD1000阻断剂,研究SDF-1α促c-kit+心干细胞的迁移；酶联免疫分析试剂盒定量检测实验组与对照组SDF-1α的表达量。利用Click-iT(?)EdU细胞增殖分析试剂盒检测c-kit+心干细胞的增殖。计量资料以x±s表示,采用SPSS 17.0软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用LSD分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果心肌成纤维转染LV-SDF-1α,1×107和1×108剂量病毒转染细胞均呈GFP绿色荧光表达,Dot-blot法示培养上清液中SDF-1α在转染后第4天时表达最高。组织块法培养的心肌组织细胞,经流式细胞仪分选可得到高纯度的c-kit+心干细胞,分选阳性率在40%左右,继续培养20天左右可见其形态由小圆亮细胞变化为长梭形或不规则椭圆形,免疫荧光显示cTnT均呈阳性表达。C-kit+心干细胞与转染LV-SDF-1α的心肌成纤维细胞Transwell技术共培养结果显示,共培养上清液中SDF-1α表达量与对照组间比较差异具统计学意义(P<0.05)；c-kit+心干细胞的迁移数量与转染CON145和AMD3100对照组相比明显增多,差异具统计学意义(P<0.05)。EdU示踪显示,SDF-1α不能有效地促进c-kit+心干细胞增殖。结论转染病毒的心肌成纤维细胞能够高表达(分泌)SDF-1α, SDF-1α体外可以有效促进c-kit+心干细胞迁移,单纯SDF-la不能有效地促进c-kit+心干细胞增殖。