蟹源二尖梅奇酵母生物学特性及其致病机制研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snoopy_cp
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二尖梅奇酵母是多种无脊椎和脊椎动物的致病真菌,近年来其宿主范围逐步扩大。2019年辽宁盘锦地区暴发的中华绒螯蟹“牛奶”病已被证实为二尖梅奇酵母感染所致。据悉该病在盘锦地区的总体发病率为30%、死亡率达20%,给该地区中华绒螯蟹养殖业造成重大损失。本文在研究二尖梅奇酵母生物学特性与致病机制的基础上调查了临床健康中华绒螯蟹蟹源酵母的携带情况与致病风险,主要结果如下:1.二尖梅奇酵母生物学特性二尖梅奇酵母在多种酵母培养基上均可生长,并形成白色、边缘光滑,中间略凸起的圆形菌落,繁殖方式为多边芽殖。该株酵母对环境的适应性较强,其在温度5-37℃、盐度0-60和p H 2-10的条件下均可以生长。以棉子糖、木糖等为代表的部分生理生化指标与三疣梭子蟹源二尖梅奇酵母不同。胞外酶活性分析证实,其不可分泌磷脂酶和酯酶,可分泌蛋白酶。该株酵母对中华绒螯蟹的毒力较强,此外以两性霉素B为代表的多种化学药物均对该株二尖梅奇酵母有较强的抑制作用。2.中华绒螯蟹二尖梅奇酵母感染的动态病理变化中华绒螯蟹“牛奶病”的临床发病过程可分为三个阶段:无症状感染期(0-4 d)、症状形成期(5-9 d)和显著液化期(10 d后)。组织学观察发现无症状感染期又可分为酵母扩散期(0-2 d)和酵母与机体免疫系统相持期(2-4 d)两个阶段。在酵母扩散期,注射到河蟹体内的酵母通过血淋巴循环传播到全身各处,并在组织中定殖。相持期以酵母周围出现许多颗粒细胞为主要特征。当肉眼观察到“牛奶”症状时酵母已经突破河蟹机体防御,此时颗粒细胞基本消失不见、各组织实质组织被酵母取代,形成真菌性菌血症。3.蟹源酵母的多样性及致病性辽宁盘锦和浙江兴化地区无临床症状中华绒螯蟹中共分离到7株酵母,分别是隶属于Papiliotrema sp.属的P.flavescens、P.aurea和P.pseudoalba,Rhodotorula sp.属的Rhodotorula diobovata,Rhodosporidiobolus sp属的Rhodosporidiobolus odoratus,Cryptococcus sp.和Vishniacozyma sp.。人工感染试验证实这些酵母未表现出对河蟹的临床致病性但可在河蟹体内增殖。当河蟹处于蜕壳期等体质较弱的阶段时这些酵母很有可能造成河蟹发病甚至死亡。
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