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自闭症又称孤独症,是广泛性发育障碍的一种,主要表现为不同程度的语言障碍、社交障碍、兴趣狭窄以及行为方式刻板等。自闭症的病因尚不明确,研究显示遗传因素可能起到很重要的作用。miRNA是一类长度约为20～25个核苷酸的非编码小RNA分子,通过与其靶基因mRNA互补配对导致降解或翻译抑制而发挥作用。研究显示miRNA在细胞分化、神经元极性、胚胎发育以及肿瘤的发生中起着重要的作用。本实验室前期工作主要包括自闭症易感基因的搜集和miR-34基因敲除果蝇的建立。前期工作已经搜集到SEMA5A、 SHANK3、 CNTNAP2等人的自闭症易感基因,并以其在果蝇中的同源基因Sema-5c、 ProSAP、 Nrx-Ⅵ为研究对象,在体外筛选到与其直接相互作用的miRNA,即miR-34。在这基础上,进一步研究miR-34在果蝇神经系统中的作用,并探讨miR-34与自闭症易感基因的相互作用关系。首先,miR-34敲除后,果蝇的攀爬能力、寿命等方面均出现下降,在神经系统过表达miR-34后果蝇成虫发育出现异常。其次,miR-34敲除后果蝇三龄幼虫NMJ4 button number和button area减少,miR-34过表达后,果蝇三龄幼虫NMJ4 Branch number.button number.button area和mini- button number均出现上升,而miR-34 KO rescue果蝇NMJ4表型恢复正常。第三,结合实验室前期的相关研究,利用dual-luciferase assay在细胞水平检测miR-34与自闭症易感基因3’UTR的相互作用。结果显示：Sema-5c、 ProSAP、 Nrx-Ⅳ可能是miR-34的靶基因。最后,利用荧光定量PCR和Western Blot检测到Nrx-Ⅳ在果蝇神经系统中与miR-34有相反的表达模式。这些结果表明Nrx-IV很可能是miR-34的靶基因。