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本课题重点研究超(亚)临界CO2萃取小球藻精油,运用响应面法对萃取工艺进行优化,探讨利用亚临界CO2萃取技术的可行性,分析互相的优劣,同时利用超(亚)临界萃取与分子蒸馏联用技术对萃取物进一步纯化,以获得浓度更高的叶黄素;同时,将超(亚)临界萃取技术与传统的提取方法(有机溶剂法、超声波辅助萃取法)进行对比,比较分析不同提取方法的优越性,并对小球藻精油中的不饱和脂肪酸分析。
通过单因素实验分析,确定了以小球藻精油得率和叶黄素浓度为考察指标的响应面设计试验的水平范围(压力:15~25MPa,温度:30~40℃,时间:2~4h,无水乙醇用量:100~200mL)。经工艺优化,小球藻精油的最佳萃取工艺为:压力:24MPa,萃取温度:36℃,无水乙醇用量:155mL(液固比为1.55:1),此时为超临界状态;重复萃取三次,得到小球藻精油得率为5.68±0.06(g/100g藻粉);叶黄素的最佳萃取工艺为:压力:16MPa,萃取温度:30℃,萃取时间:2.8h,无水乙醇用量:199mL(液固比为1.99:1),此时为亚临界状态;重复萃取三次,得到叶黄素浓度为7.13±0.10(mg/g小球藻精油)。
本文还对超临界CO2萃取与亚临界CO2萃取之间作了进一步的比较,通过单因素的比较分析,在小球藻精油得率上,超临界CO2萃取具有明显的优势;而在叶黄素的纯度上,亚临界CO2萃取相比具有明显的优势。通过超(亚)临界CO2萃取与有机溶剂提取法以及超声波辅助萃取法的比较分析,在小球藻精油得率与叶黄素纯度上,超(亚)临界CO2萃取工艺均比有机溶剂提取法优胜,而只是在小球藻精油得率上比超声波辅助萃取法稍差。
在叶黄素的纯化上,通过对皂化反应与分子蒸馏技术各自特点的分析,实现了皂化反应与分子蒸馏技术的联用。经纯化后,叶黄素浓度最高可达到230.56±0.23mg/g,为高纯度叶黄素的大量生产打下了坚实的基础。
通过对小球藻精油与纯化所得的叶黄素晶体抗氧化性的初步分析,两者均具有良好的抗氧化性。小球藻中含有种类丰富的不饱和脂肪酸,其中含量较高的主要有α-亚麻酸、亚油酸、十六碳二烯酸、棕榈油酸与14-甲基十五烷酸。