PI3k-Akt信号通路在2型糖尿病大鼠易发心房颤动中的介导作用

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目的:探讨糖尿病大鼠易发心房颤动的结构与电重构机制及PI3k-Akt信号通路在其中的作用。方法:24只(随机分为3组)8周龄雄性糖尿病大鼠,以及同源的8周龄京都威斯特(WKY)大鼠,共4组,每组8只;①GK+IGF组:糖尿病+PI3K激动剂(胰岛素样生长因子,IGF-1),每天尾静脉注射IGF-1 1.5μg/kg,持续4周;②GK+IGF+L-NAME组:糖尿病+IGF-1+e NOS抑制剂(N-硝基-L-精氨酸甲酯,L-NAME),每天尾静脉注射L-NAME 1.5μg/kg,30分钟后注射IGF-1 1.5μg/kg,持续4周;③GK组:糖尿病大鼠,每天尾静脉注射等量的生理盐水;④WKY组:对照组,每天尾静脉注射等量的生理盐水。用彩色多普勒超声检测大鼠左房前后径(LA)的改变;HE染色观察左心房肌细胞大小及形态;Masson染色分析测定左心房胶原纤维含量及分布;免疫组化分析左心房肌细胞内PI3K和e NOS的表达;免疫印迹(Western blot)检测大鼠左心房肌组织PI3K、p-e NOS的表达;多导电生理记录仪测量心房电参数,包括P波时限、PR间期、心房有效不应期(AERP)及离散度、房颤诱发率和持续时间。结果:1.HE染色显示:GK组和GK+IGF+L-NAME组心房肌细胞与WKY组比较明显增大且排列紊乱(P<0.01);GK+IGF组与WKY组心房肌细胞相比大小相似,排列规则。2.Masson染色显示:GK组和GK+IGF+L-NAME组心房肌间质胶原沉积较WKY组明显(P<0.01),GK+IGF组心房肌间质仅少量胶原沉积。3.超声检测:GK组和GK+IGF+L-NAME组较GK+IGF组和WKY组左房前后径增大,但无统计学差异(P>0.05)。4.Western blot结果显示:GK+IGF组和WKY组心房肌细胞PI3K蛋白和p-e NOS蛋白表达水平明显高于GK组和GK+IGF+L-NAME组(P<0.01)。5.电生理检测结果:与GK+IGF组、WKY组相比,⑴GK组和GK+IGF+L-NAME组P波时限明显延长(P<0.01);⑵GK组和GK+IGF+L-NAME组PR间期明显延长(P<0.05或P<0.01);⑶GK组和GK+IGF+L-NAME组AERP离散度明显增加(P<0.05)。⑷GK组与GK+IGF+L-NAME组房颤诱发率与房颤持续时间明显增加(P<0.01)。⑸各组大鼠AERP无明显差异。⑹GK+IGF组与WKY组间,GK组和GK+IGF+L-NAME组间,P波时限、PR间期、AERP离散度及房颤诱发率与持续时间无明显差异(P>0.05)。结论:1.2型糖尿病大鼠的左心房组织可发生结构重构和电重构,房颤易感性增加;2.PI3K-Akt-e NOS信号通路可能是介导糖尿病易发房颤的信号通路。
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