【摘 要】
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小麦黄矮病是我国流行最广泛、危害最严重的麦类病毒病之一。该病害是由大麦黄矮病毒（barley yellow dwarf viruses,BYDVs）引起的,由蚜虫介体进行专化型传播,小麦感病后植株表现出矮化、叶片蜡质黄化和无效分蘖增多等症状,严重影响小麦的产量。目前,农业生产中主要采用农业防治和化学防治相结合的综合治理方法,以期达到防病增产的作用,然而,防治效果有限。随着生物技术的进步,从上个世纪
【基金项目】
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转基因抗病毒小麦新品种培育（No.2009ZX08002-003B）； 高等学校学科创新引智计划（No.B07049）；
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小麦黄矮病是我国流行最广泛、危害最严重的麦类病毒病之一。该病害是由大麦黄矮病毒（barley yellow dwarf viruses,BYDVs）引起的,由蚜虫介体进行专化型传播,小麦感病后植株表现出矮化、叶片蜡质黄化和无效分蘖增多等症状,严重影响小麦的产量。目前,农业生产中主要采用农业防治和化学防治相结合的综合治理方法,以期达到防病增产的作用,然而,防治效果有限。随着生物技术的进步,从上个世纪末国内外开始探索通过基因工程育种进行防治小麦黄矮病的方法。本实验是在前人实验的基础上,采用分子生物学检测和种植区调查相结合的方法,继续对抗大麦黄矮病毒转基因小麦进行分析,进一步了解转基因小麦的抗病能力和对周围环境的影响,寻找防治小麦黄矮病的新策略。使用PCR方法,对利用RNAi介导的转GAV-CP基因小麦、转GAV-CP-WDV-CP小麦、转ATPsE小麦进行遗传稳定性鉴定。在T7代转GAV-CP基因小麦个别单株中检测到GAV-CP基因序列,转入基因片段大小小于T6代转基因小麦检测到的序列;在T0代转ATPsE小麦单株中检测到载体上的抗潮霉素基因序列。使用TAIL-PCR方法对T7代转GAV-CP基因小麦进行插入位点分析。拟通过该方法扩增得到转入基因插入位点侧翼序列,从而明确转入基因的插入位点;但由于小麦基因组庞大,转入基因的片段又过小,实验过程中没有得到插入位点侧翼序列。通过蚜虫传毒和RT-PCR方法对隔离区种植的T7代、T8代转GAV-CP基因小麦进行抗病性鉴定。RT-PCR和农艺性状调查数据显示转GAV-CP基因小麦对大麦黄矮病毒具有抗性。通过调查和PCR方法对隔离区种植的T7代、T8代转GAV-CP基因小麦周围环境进行分析,实验数据显示转基因小麦没有对杂草、昆虫和其他病害的发生产生影响。
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