傣药竹叶兰中抗肝纤维化活性成分的研究

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肝纤维化是所有慢性肝病的共同病理过程,从分子机制研究中发现肝纤维化是可逆转的,所以对肝纤维化进行早期干预尤为重要。傣药复方保肝胶囊具有良好的保肝利胆效果,可用于治疗肝纤维化,在傣族地区的临床应用广泛,但是其治病机制尚不明确。竹叶兰(傣药名为百样解)是保肝胶囊的三味主药之一,属于兰科(Orchidaceae)竹叶兰(Arundina)属植物,具有清热解毒,散瘀止痛,消炎利尿等功效。为明确竹叶兰的物质基础并筛选出活性成分,本课题以竹叶兰正丁醇部分作为研究对象,主要研究内容及成果如下:(1)应用多种柱色谱、液相色谱分离技术从竹叶兰的正丁醇萃取部分中分离得到8个单体化合物;结合一维和二维核磁共振、高分辨质谱等方法确定了8个化合物的结构,属于2-苯甲基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类,均为首次报道。(2)使用HPLC-MS/MS~n技术系统研究了分离鉴定的苹果酸葡萄糖氧基苄酯类化合物的质谱裂解规律,并根据此规律对含量少的同类化合物进行了快速鉴定,在线解析了27个成分的可能结构。(3)使用DS虚拟筛选软件对竹叶兰已知结构的化学成分与肝纤维化相关蛋白进行了虚拟筛选。结果显示苹果酸葡萄糖氧基苄酯类化合物与TGF-β1、TLR4、My D88有较好的结合趋势。(4)成功建立了脂多糖刺激大鼠肝星状细胞HSC-T6产生纤维化的细胞模型,并测定了化合物1~8的抗肝纤维化活性,其中化合物1、4、5活性较好。同时在分子水平上验证了虚拟筛选的结果,化合物1能有效抑制TGF-β1、My D88的表达水平,与筛选结果基本一致。综上所述,本文对竹叶兰正丁醇部分的化学成分进行了系统的研究,包括化合物结构确定和抗纤维化活性筛选等方面,对竹叶兰的现代化开发利用具有重要意义。
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