背景与目的:BCG用于治疗膀胱癌已逾30年,能有效减少膀胱肿瘤的复发与进展,虽然经过不断改进提纯,但其灌注后引起局部和全身副作用的发生率依然较高,限制了BCG的应用。临床上需要效果与BCG类似但副作用相对较少的膀胱灌注药物。Rv0652是结核杆菌属PE＿PGRS蛋白家族成员,已有研究显示Rv0652能产生相关免疫学效应,但Rv0652用于膀胱癌的研究尚未见报道。因此本研究旨在探索结核杆菌属PE＿PGRS蛋白家族成员Rv0652对膀胱癌的抗肿瘤效应。方法:1.体外构建p ET28a-Rv0652表达质粒,表达纯化蛋白质Rv0652,免疫印记验证蛋白质。2.分别使用蛋白质Rv0652及BCG刺激膀胱癌细胞系,CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附实验检测细胞上清IL-6,IL-8因子的浓度3.利用BBN诱导小鼠形成原位膀胱肿瘤,进行Rv0652膀胱灌注,HE染色评估肿瘤情况,流式细胞术检测小鼠脾脏、淋巴结中淋巴细胞比例,流式细胞术检测膀胱组织中MDSC细胞的比例。结果:1.体外重组表达蛋白质Rv0652.体外得到纯化的Rv0652后,免疫印记验证纯化的蛋白质与目标蛋白质分子量相同。2.分别使用蛋白质Rv0652及BCG刺激膀胱癌细胞系,CCK8显示Rv0652能抑制膀胱癌细胞系的增殖,流式细胞术显示Rv0652能促进膀胱癌细胞的凋亡,效果与BCG无明显差异。酶联免疫吸附实验显示Rv0652能促进膀胱癌细胞系炎症因子释放,但显著低于BCG。同时在BBN诱导的小鼠膀胱原位肿瘤模型中,HE染色显示Rv0652膀胱灌注能抑制肿瘤生长,能降低膀胱组织重量,减少发生浸润性膀胱癌的比例,与BCG组对比无明显差异。流式细胞术显示Rv0652膀胱灌注可以升高小鼠腹主动脉旁淋巴结CD4+、CD8+淋巴细胞比例,升高脾脏中CD4+淋巴细胞比例,同时下调膀胱组织中MDSC细胞的比例,效果与BCG相比无明显差异。结论:结核分枝杆菌PE＿PGRS蛋白质家族成员Rv0652可以通过其直接毒性作用及免疫学效应抑制膀胱癌发展,能产生BCG类似的抗膀胱肿瘤效应,可能引起较低的粒细胞募集效应,且Rv0652作为蛋白质,不具有结核菌的致病性和内毒素,规避了BCG引起结核感染的风险,减少BCG的副反应,可能成为BCG膀胱灌注的可选择的替代治疗方案。