冷冻联合放疗治疗C6大鼠脑胶质瘤的实验研究

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目的:观察冷冻与放疗联合应用对C6脑胶质瘤的协同杀瘤效应,并探讨其内在的分子机制.方法:⑴动物模型的建立:选用健康雄性Wistar大鼠(4-6周龄,体重200-250g),取培养的C6胶质瘤细胞悬液(1×10<6>个/只),依立体定向仪接种于大脑皮质右S1区位置,14天后肿瘤长至6mm大小后,随机分组分别施以冷冻、放疗及冻放疗.⑵冷冻、放疗、冻放疗的实施:a单纯冷冻组:直径为2mm探头冷冻探头插入肿瘤中心,待冷冻范围覆盖整个肿瘤组织后自然复温;b单纯放疗组:经X刀照射,单次剂量为15Gy,剂量率为2Gy/min;c冻放疗联合组:冷冻实施过程与单纯冷冻组相同,冷冻后2h内立即行放疗;d对照组:未加任何处理.每组大鼠均在处理后两天处死,剥取瘤块,按不同检测要求保存标本.⑶用TUNEL法检测各组细胞的凋亡数目.⑷免疫组化法观察各组处理后肿瘤中P16、CyclinD1阳性表达率.⑸流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分析.
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