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本研究选用MT-4细胞(CD4+T淋巴细胞系)和PBMC(人外周血单核细胞)建立体外HIV-1的病毒吸附、共培养、急性感染三种标准感染模型,检测蛇葡萄素对细胞的保护作用和对HIV-1抗原P24的抑制。建立H2O2体外诱导MT-4细胞凋亡模型,用形态学、生化及流式细胞技术检测药物对过氧化诱导凋亡的调控,评价蛇葡萄素的抗氧化损伤作用及对T淋巴细胞凋亡的抑制作用。
本实验拟通过体外抗病毒实验,观察蛇葡萄素对HIV-1感染的抑制作用;了解蛇葡萄素、RANTES、SDF-1α各自的趋化作用和相互影响;利用荧光标记单克隆抗体,检测蛇葡萄素对HIV-1辅助受体CXCR4的作用;选用研究HIV-1作用常用的CD4+T淋巴细胞系MT-4细胞,采用过氧化氢(H2O2)为诱发因素,通过MTT法检测细胞的存活率,Hoechst33258核染色法、琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞术检测细胞的凋亡情况;对蛇葡萄素清除氧自由基的能力进行检测,同时采用体外诱导T淋巴细胞氧化应激凋亡模型,用形态学、生化及流式细胞技术检测药物对过氧化诱导凋亡的调控,结果表明,蛇葡萄素可有效清除·OH和O2·-,抑制氧化应激造成的T淋巴细胞凋亡,为研究其抗HIV的机制提供了新的途径。