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本研究以花鲈(Lateolabrax maculatus)为对象,研究了不同水温(27℃、33℃)下花鲈对饲料蛋白质需求量及适宜蛋能比。同时,对不同水温下花鲈的肝脏和脾脏进行转录组分析,以探究不同水温下花鲈营养物质代谢、免疫反应的异同。主要研究内容如下:(1)不同水温下花鲈对饲料蛋白质需求量的研究配制蛋白质水平分别为35%、38%、41%、44%、47%、50%的6组饲料(P35、P38、P44、P47、P50),并分别投喂低温(27℃;LT)和高温(33℃;HT)养殖下的花鲈(初始体重:2.00±0.01 g)。试验共12个处理组(6个蛋白质水平×2个温度水平),每个处理组为4个重复,试验周期为8周。养殖试验期间,每天饱食投喂3次,养殖试验结束后采集样品并测定分析。结果表明,蛋白质水平和水温均显著影响生长和饲料利用率(P<0.05),但无显著交互作用(P>0.05)。各处理中,P47LT组的增重率最高,显著高于P35LT、P38LT、P41LT和所有HT组。此外,在两个水温下,饲料蛋白质水平升高至47%后饲料系数显著降低了。在两个水温下,升高饲料蛋白质水平可以提高肠道蛋白酶的活性,且HT组的活性显著高于LT组(P<0.05)。肝脏柠檬酸合成酶和琥珀酸脱氢酶的活性显著受蛋白质水平和水温的影响(P<0.05),在P47LT组中达到最高值。高温导致血清甘油三酯浓度显著提高(P<0.05)。此外,我们分析了肝脏转录组,并比较了在LT组与HT组花鲈的物质代谢相关基因的表达。KEGG富集分析表明,多数差异表达基因涉及氨基酸、脂肪酸和葡萄糖的代谢及一些信号传导途径。转录组结果表明,高温可能引起花鲈三大营养物质代谢和热应激的变化。根据本试验结果,得出以下结论:在27℃和33℃水温条件下,花鲈对饲料的蛋白质需求量分别为46.8%和44.9%;不同水温下花鲈对蛋白质需求量的差异,与肝脏营养物质代谢通路的改变有关。(2)不同水温下花鲈饲料适宜蛋能比的研究本试验设2个蛋白质水平(44%、47%)和3个饲料脂肪水平(8%、11%、14%),配制了不同蛋能比(P/E)的6组饲料,分别为:22.31、23.27、23.47、24.05、24.35、25.55 g MJ-1。并分别投喂低温(27℃;LT)和高温(33℃;HT)养殖下的花鲈(初始体重:2.67±0.01 g)。试验共12个处理组(6个蛋能比×2个温度水平),每个处理组为3个重复,试验周期为8周。试验期间,每天饱食投喂3次,试验结束后采集样品并测定分析。结果表明,P/E和水温显著地影响鱼体增重率(P<0.05),但是无显著交互作用(P>0.05)。饲料系数(FCR)受P/E的显著影响(P<0.05),蛋能比为22.31时低温组的花鲈表现出最低的饲料系数,此时蛋白质水平为44%、脂肪水平为14%。肠道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性均不受P/E和水温的显著影响(P>0.05)。肝脏柠檬酸合成酶和琥珀酸脱氢酶的活性受水温的显著影响(P<0.05),且低温组活性要高于高温组。本试验结果表明,以花鲈增重率(WG)为评价指标,花鲈在LT和HT条件下饲料的适宜P/E分别为24.35 g MJ-1和23.47 g MJ-1。(3)水温和蛋能比对花鲈非特异性免疫的影响本部分试验设计同2,为探明水温和蛋能比对花鲈免疫的影响,本部分研究了不同水温下摄食不同蛋能比饲料花鲈的非特异性免疫的活性,并分析了高低温下(27℃、33℃)花鲈非特异性免疫活性及脾脏转录组。测定了花鲈血清的溶菌酶、补体3、补体4和免疫球蛋白M活性或含量。结果发现,蛋能比对鱼体非特异性免疫无显著影响(P>0.05),而受到水温的显著影响(P<0.05),且高温会降低所有指标的活性或含量;结果表明,高温抑制了花鲈的非特异性免疫活性。为深入阐明高温抑制花鲈免疫活性的分子机制,对试验花鲈的脾脏转录组进行了分析,比较了LT和HT试验花鲈的免疫相关基因表达。KEGG富集分析表明,多数差异表达基因涉及IgT产生和吞噬途径的免疫网络,且高温组的相关基因下调。研究结果表明,水温会抑制花鲈的非特异性免疫,且免疫抑制可能是由于“肠道免疫网络中IgT产生”和“吞噬体”途径中的基因下调所致。