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猪链球菌(Streptocuccus suis,S.suis)是一种重要的人畜共患病原菌。根据荚膜多糖(capsular polysaccharide，CPS)抗原成分不同，可以将猪链球菌分为35个血清型(1.34型和1／2型)。其中，猪链球菌2型(Streptocuccussuistype 2，SS2)是最常见、也是毒力最强的血清型。猪链球菌是一种条件致病性病原菌，成年猪感染后一般不表现任何临床症状。但是，受到应激因素的刺激，往往会加剧发病率和死亡率。血清学调查(sero-surveillance)或抗体水平监测(antibody monitoring)有助于了解猪群中链球菌感染状况，为控制猪链球菌病提供科学的依据．目前，有一些方法可以用于SS2抗体检测，如ELISA和琼脂扩散试验等，但这些方法由于费时或成本高等因素的制约，只能用于实验室诊断，不适合用于大量样品的检测。因此，急需研制一种快速检测SS2抗体的方法，对我国SS2血清流行病学进行调查。本试验应用胶体金标记技术(immunogold labeling technique)，根据免疫层析原理，用胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA)作为探针，用纯化的SS2 CPS和健康猪IgG分别作为检测线试剂和对照线试剂，研制了一种SS2抗体快速检测试纸条。该试纸条具有检测快速和使用方便等优点，可以适用于临床样品的大量检测，为SS2血清抗体检测提供了有效的工具。用该试纸条检测16份SS2感染康复猪血清抗体和24份SS2高免猪血清，试纸条检测为100％阳性，与ELISA法检测结果完全一致；检测68份其它细菌高免血清或健康猪血清，结果除一份链球菌1型(SS1)高免血清呈弱阳性外，其余均为阴性。用试纸条检测20份阳性高免血清抗体滴度，结果表明试纸条的敏感性和ELISA相当。用试纸条和ELISA检测486份临床血清样品，结果表明试纸条的特异性(specificity)为94.6％，敏感性(sensitivity)为91.7％，两种方法检测结果的符合度很高(kappa=0.863)。由此表明，试纸条法可以代替ELISA在临床检测中的应用。深入了解猪链球菌的致病机理，可以为链球菌病的预防和治疗提供科学的依据。病原菌与宿主细胞之间的相互作用，在致病过程中发挥着重要的作用。研究病原与宿主细胞相互作用，可以促进对致病机理的探索。并可以为药物筛选、疫苗设计提供理论依据，以便制定科学的疫病控制措施。纤连蛋白结合蛋白(FBPS)由链球菌Fbps基因编码，可以与人的纤维结合蛋白和纤维蛋白素原结合。在SS2感染过程中，FBPS与细菌在特定器官中的定殖有密切关系，推测FBPS与SS2的致病性有关。因此，本试验用CytoTrap酵母双杂交技术，研究FBPS与宿主细胞蛋白质相互作用，旨在探索FBPS在SS2致病性中的作用。用PCR方法扩增SS2 Fbps全长基因，定向克隆到pSos载体多克隆位点中，构建bait载体(pSos-Fbps)。并将Fbps克隆到pET-28c载体中，构建重组表达载体。将pSos-Fbps和鼠cDNA文库(pMyr-cDNA)共转化cdc25H酵母细胞，筛选与FBPS相互作用的克隆。经过筛选和重复验证，得到2个与FBPS相互作用的阳性克隆，并对Target载体插入片段进行测序，经BLAST分析，两个基因分别与凋亡抑制因子5(apoptosis inhibitor 5，API 5)基因和锌指结构FYVE结构域27(zinc finger FYVE domain containing 27，ZFYVE 27)基因的同源性为99％和100％。将重组原核表达载体pET-28c-Fbps转化BL21大肠杆菌细胞，进行FBPS蛋白质表达。分别用PCR扩增API 5和ZFYVE 27全长基因，定向克隆到pcDNA3.1/myc-His载体中，构建真核表达载体(pcDNA3.1/myc-His-API 5和pcDNA3.1/myc-His-ZFYVE 27)，并分别转染293T细胞进行表达。将细胞裂解后，用兔抗Myc抗体共沉淀FBPS和ZFYVE 27或FBPS和API 5复合物，再用SS2高免血清进行Western-blotting分析。用免疫共沉淀试验分别证了FBPS与API 5和ZFYVE 27之间的相互作用。