基于金纳米粒子放大的毛细管电泳分析研究

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本文主要研究了纳米材料在毛细管电泳在线富集方法上的应用,由于纳米材料具有生物相容性好、比表面积大、物理化学性质稳定等特点,于毛细管在线富集方法上具有显著作用。通过对纳米材料的应用,富集效果显著提高。本文共分为三个章节:第一章,主要对毛细管电泳技术进行了介绍。首先,讨论了毛细管电泳的发展及应用,重点涉及毛细管电泳的几种分离模式;然后,对毛细管电泳在线富集技术的发展进行了概括;其次,展望国内外毛细管电泳研究现状,对一些在毛细管电泳发展过程中具有重要作用的创新进行了介绍;最后,介绍了纳米材料在毛细管电泳上的应用,分别列举了几种具有重要特性的功能性纳米材料以及在毛细管电泳分离方法上所起到的作用。第二章,基于外部磁场和纳米金放大的毛细管电泳免疫分析超灵敏在线快速检测雪卡鱼毒。本章节提出了一种基于毛细管电泳分离与电化学免疫分析联用的快速灵敏在线检测CTX3C的方法。在这种三明治夹心结构的的免疫实验中,将修饰有CTX3C抗体的磁性纳米材料作为探针,同时将辣根过氧化物酶以及CTX3C抗体修饰到纳米金颗粒表面上作为识别因子。通过在毛细管进样口外部设置一个外部磁场使免疫复合物在线合成得以实现。与传统的高效液相色谱-质谱以及酶联免疫反应方法相比,这种采用纳米金作为多酶载体、基于外部磁场在线形成三明治结构的免疫复合物的方法具有灵敏度高、分析时间短等特点。本方法检测CTX3C的线性范围是0.6-150 ng·L-1,相关系数是0.9948,而最低检出限达到了0.09ng·L-1。本方法具有良好的稳定性和重现性,而且能够用于鱼类样品中鱼肉素的定量检测。第三章,基于纳米金信号放大的胶束电动毛细管色谱法在线检测苯胺和对甲苯胺。本实验提出了一种胶束电动毛细管色谱在线一次富集与纳米金二次信号放大联用的检测方法,用于快速在线检测苯胺和对甲苯胺。首先是在静电作用下,将带有正电荷的样品聚集到带有负电荷的胶团表面,形成带有正电荷的一次聚集体;然后在毛细管中引入带有负电荷的纳米金,同样在分子间静电作用下,带有正电荷的胶团聚集到纳米金颗粒表面,达到检测信号二次放大的目的。这种用于在线检测苯胺和对甲苯胺的方法,具有灵敏度高、操作简单、稳定性好等优点。苯胺和对甲苯胺的最低检出限分别达到了0.114×10-9 mol·L-1和2.656×10-9 mol·L-1。与毛细管区带电泳以及单纯的胶束电动毛细管色谱法相比,本方法用于检测苯胺和对甲苯的灵敏度分别提高了13421倍、6740倍和972倍、361倍。
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