论文部分内容阅读
花生是南方低丘红壤区的主要油料作物和经济作物,近年来,随着花生种植的集约化和规模化,花生连作障碍日益严重。目前缓解花生连作障碍的方法主要有轮作间作换茬、选用耐连作品种、合理施肥以及施用微生物制剂等。研究施肥和微生物菌剂处理对连作花生生长及土壤微生物群落结构的影响,可以为缓解花生连作障碍提供相适应的肥料和微生物菌剂施用措施。本文通过设置田间试验和盆栽试验,分析不同肥料和微生物菌剂处理对花生生育性状的影响；通过直接法从土壤中提取总DNA,利用细菌通用引物扩增16S rDNA V3区,真菌引物扩增18S rDNA,通过DGGE技术分析不同处理土壤样品中的微生物群落结构差异；从不同处理土壤中分离芽孢杆菌,通过RFLP技术分析不同处理土壤样品中的芽孢杆菌群落多样性。田间试验中,复混化肥+有机K肥+微肥(T7)处理的花生生长状况最好,其产量较对照(T8,不施肥)提高了53.99%。复混化肥对于花生生长最为重要,有机K肥次之,微肥最小。施用的微生物菌剂也能一定程度上增加花生的产量,枯草芽孢杆菌与光合细菌联合施用(T11)的花生产量比对照提高了32.14%。微生物计数结果显示,施用微生物菌剂(T9、T10、T11)的土壤样品所含细菌和放线菌的数量有所增多,而真菌数量减少。通过对不同样品的DGGE图谱分析表明,所有处理样品的细菌及真菌种类均比较丰富,经过微生物菌剂处理的土壤样品的细菌种类略微偏多,而真菌则有所减少；经过聚类分析发现,总体上,经过微生物菌剂处理的土壤样品聚集到了一起,不同施肥处理的土壤样品微生物群落结构差异并显著。通过对12个土样中的可培养芽孢杆菌进行16S rDNA的PCR-RFLP分析,共获得7个OTUs.多样性指数分析表明,施用含有芽孢杆菌菌剂处理的土壤样品芽孢杆菌多样性偏低,而其它处理之间相差不大。16S rDNA测序结果发现各土壤样品中芽孢杆菌的优势类型均为枯草芽孢杆菌、腊质芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌。施用芽孢杆菌菌剂的土壤样品所含的腊质芽孢杆菌比例要比其它处理高出15%左右。盆栽试验中,施用微生物菌剂浓度为1010cfu/mL处理(P2、P4、P6)的花生生长状况总体上要比稀释10倍的好,芽孢杆菌和光合细菌混施(P6)的效果最好。微生物计数结果显示,施用微生物菌剂浓度为1010cfu/m处理的土壤样品所含细菌数量偏多,而真菌数量偏少,其中芽孢杆菌和光合细菌混施的样品最为明显。通过对不同样品的DGGE图谱分析发现各土壤样品中所含细菌及真菌种类均比较丰富。聚类分析则表明各土壤样品之间相似性相差不大,浓度为1010cfu/mL芽孢杆菌和光合细菌混施的的土壤样品的群落结构与对照差异最大。通过对7个土样中的芽孢杆菌进行16S rDNA的PCR-RFLP分析,共获得6个OTUs.多样性指数分析表明,总体上,施用芽孢杆菌菌剂处理的土壤样品的芽孢杆菌多样性有所减低。16S rDNA测序结果发现各土壤样品中芽孢杆菌的优势类型同样为腊质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌。施用浓度为1010cfu/mL的芽孢杆菌菌剂的土样所含腊质芽孢杆菌的比例也有一定程度上的上升。