滋阴活血解毒方对AGEs诱导VEC损伤黏附分子及凝血相关因子表达的影响

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实验目的:通过观察滋阴活血解毒方对糖基化终末产物(AGEs)诱导血管内皮细胞(VEC)损伤的影响及其诱导损伤过程中黏附分子和凝血相关因子表达的变化,进一步探讨该方对糖基化终末产物(AGEs)诱导血管内皮细胞(VEC)损伤的保护作用。实验方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为实验对象,先以终浓度为(100mg/L)的AGEs-HSA诱导HUVEC细胞损伤。然后,把每个模型组和给药组的细胞再培养12h、24h和48h。在实验培养过程中注意使用显微镜观察每组细胞的形态结构变化,通过western-blot法来检测每组细胞黏附分子VCAM-1及ICAM-1的蛋白表达;通过RT-PCR方法来检测表达组织因子(TF)及血栓调节素(TM)的mRNA表达。实验结果:相对于空白组细胞,模型组细胞出现异常增殖,细胞数量明显增多,多数细胞变形皱缩,胞膜轮廓模糊不清,细胞内出现粗糙样颗粒变化,VCAM-1、ICAM-1、TF表达明显上调,TM表达下调,在培养24h后有明显的区别(P<0.01);在同一培养时间段,给药组细胞较模型组圆缩形细胞明显减少,能明显下调VCAM-1、ICAM-1、TF表达,上调TM表达,增加培养时间能使差异更显著(P<0.01)。实验结论:滋阴活血解毒方能抑制AGEs对血管内皮细胞的损伤,通过降低黏附分子的表达,下调表达组织因子m RNA转录,上调血栓调节素mRNA转录,以抑制炎症相关的细胞内的粘附过程和原始局部血栓形成。
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