自然条件下微生物生长的环境的营养都是很苛刻,是寡营养环境,微生物可利用的养分相对更少,然而在这种极端的生存环境中微生物是怎么活下来以及使人致病,这值得我们深思。风险评估在食品安全控制中起着把控的作用,根据风险大数据预测风险,并将风险降到最低。微生物异质性影响了风险评估结果的准确性,为了更好的把控风险,需要研究微生物的异质性,它包括生长和失活异质性、被膜异质性、毒力异质性以及耐药异质性。此外,细菌进入活得不可培养状态（VBNC）也会影响风险评估结果的准确。因此研究寡营养条件下的菌株的生长、被膜以及进入VBNC状态的异质性是必要的。本研究采用稀释培养基的方法模拟了不同寡营养环境,分析副溶血性弧菌在不同寡营养条件下的生长异质性和被膜形成异质性,以及研究了长期4℃人工海水培养条件下副溶血性弧菌进入VBNC状态的异质性。整体分析副溶血性弧菌的异质性,旨在从中发现副溶血性弧菌在不同寡营养条件下生存规律,为开展精准的风险评估提供理论依据。本文主要研究内容及结果如下:1.不同寡营养条件下副溶血性弧菌的生长异质性副溶血性弧菌是水产品中一种重要的食源性病原体,可以在寡营养环境中长期存活并保持致病性。在这项研究中,模拟了38种VP（临床和环境性菌株）在不同寡营养条件下（胰蛋白大豆肉汤（TSB）,TSB稀释2倍,4倍和6倍培养基）的生长曲线,其生长异质性为比较的。通过修正的Gompertz模型计算了生长动力学参数(最大比生长速率(μmax)和延滞时间（LT）)。结果表明,寡营养条件影响菌株的生长变异性,所有菌株的变异系数（CV）在TSB的4倍稀释液中达到最大值。在不同的寡营养条件下,临床菌株的LT比环境菌株的LT短,而环境菌株的μmax更大。这表明病原菌株更适合缺乏营养的环境。对不同基因型的分析表明,在寡营养环境中,基因型为tlh+/tdh+/trh-的菌株显示出更大的生长变异性。这些结果为水产品风险评估的准确性提供了理论支持。2.不同寡营养条件下副溶血性的被膜形成异质性细菌在寡营养环境中会聚集在一起形成被膜抵抗外界不良环境。本研究中,分析了副溶血性弧菌在不同寡营养条件下的被膜动态形成过程,临床和环境菌株被膜形成时间异质性、最大生物量和细胞活性异质性,并用激光扫描共聚焦分析了被膜结构。结果表明,在TSB和4倍稀释的TSB条件下,被膜在36h形成量最大;2倍稀释的TSB条件下,被膜在24h形成量最大;而6倍稀释的TSB培养条件下,被膜形成量无明显增加。在TSB和6倍稀释的TSB条件下,被膜形成变异性最大时间点为36h,而在2倍稀释的TSB和6被稀释的TSB中被膜形成异质性最大的时间点在12h。此外,环境菌株的被膜形成异质性较临床菌株大。说明被膜形成的变异性受营养、时间还有菌株来源的影响。VP在寡营养条件下形成被膜的能力强,环境菌株中VPE5和临床菌株的VPC9的被膜形成能力强,且随着营养浓度的降低,被膜结构越来越稀疏。3.人工海水培养下副溶血性弧菌进入VBNC状态异质性副溶血性弧菌在长期低温（4℃）寡营养条件下会进入VBNC状态,为了研究细菌在长期寡营养条件下的存活异质性,本研究通过涂布平板方法测定可培养活菌数,并采用RT-q PCR的方法检测培养50天后的副溶血性弧菌毒力基因的变化以及扫描电镜观测细胞形态的变化。结果表明,随着培养时间的增加,可培养活菌数缓慢减少,环境菌株中VPE5和临床菌株中VPC9减少相对较快,人工海水培养50d后所有菌株都未全部进入VBNC状态;通过比较培养50d后菌株的毒力相关基因的表达情况发现VPC9与细胞毒性和肠毒性相关基因增加显著,而VPE5的相关基因表达量增加较少;长期低温寡营养培养使得菌体表面均出现明显的褶皱,甚至有些细胞出现裂解现象,而VPE5由杆状变为圆球,细胞缩小;VPC9则变成正方体等不规则形状,说明VP进入VBNC状态菌体形状变化也存在异质性。