肝纤维化(hepatic fibrosis)是各种肝损伤因素致肝内弥漫性细胞外基质(extracellular matrix, ECM)成分过度沉积的病理过程,是肝硬化的前期阶段。慢性肝炎肝纤维化、肝硬化严重威胁着人类的健康和生命,已成为国内外医学界研究的热点,随着对肝纤维化发生、发展的认识加深,对早期肝纤维化的阻断、对肝纤维化进程的减缓和逆转,是预防、延缓肝硬变有效治疗方法,以上认识已逐渐被医药界采纳。目前化学药尚无有效、安全的治疗肝纤维化药物,中药在肝纤维化治疗领域独具优势。超微粉碎技术是近年来发展起来的跨学科、跨行业的高新技术,同时也是古老粉碎技术的新发展和新应用。该技术引入中药加工领域,产生了微米中药、纳米中药。中药材经超微粉化后,可以使细胞破壁率提高,增加有效成分的溶出度、体内生物利用度,可增加增加药效,从而增强临床疗效。此外,可节省药材,对减少中药资源的浪费具有重要现实意义。本文所研制的中药复方制剂十二味穿甲片(后文简称SWP),由鳖甲、穿山甲、南五味子、赤芍等中药组成,适用于肝硬变气滞血瘀、气虚血亏、水湿毒邪未尽之证,适用于肝硬变静止期或活动期,具有较好的抗人体肝纤维化及早期肝硬化功效。本实验采用超微粉技术对南五味子进行了微粉化处理,对不同粒度南五味子粉体的粒径及体内药代代动力学进行了比较研究,并对不同粒径的南五味子所制备的SWP的体外溶出行为进行了考察,为南五味子的粒径选择提供了实验依据。结果显示,南五味子超微粉粒径小,分布窄；超微粉中南五味子甲素deoxyschisandrin (DS)溶出的速度与程度要高于普通粉；大鼠血药浓度曲线经DAS2.0程序拟合,超微粉中DS的AUC(0-8)为58.853,是普通粉的2.71倍。本文运用血清药理学方法,体外观察鳖甲细粉和超微粉对HSC-T6细胞生长的影响。分别采用多因素的正交试验、单因素考察,优选含药血清的制备方法,并确定体系中血清添加量,根据确定的血清药理学方法,在HSC-T6的培养体系中添加鳖甲粗粉和超微粉水煎剂含药血清,MTT法检测含药血清对HSC-T6的抑制作用。结果显示,鳖甲超微粉水煎剂较细粉有较强的抑制HSC-T6增殖的作用。故我们选择对鳖甲进行超微粉碎。本文通过对五味子微粉化工艺和提取工艺的考察,最终确定了十二味穿甲片的最佳制备工艺为穿山甲、鳖甲、南五味子经微粉化粉碎；赤芍等九味药,加8倍量水回流2次,每次1小时,合并提取液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.10-1.12的浸膏；取上述穿山甲、鳖甲、南五味子细粉,加入到浸膏中,混匀,制粒,70℃干燥,加入3%羧甲基淀粉钠和0.3%硬脂酸镁,拌匀,压片,包薄膜衣,即得。本文对SWP的质量标准及稳定性进行了研究,制定了严格的质量标准,经检测各项指标均在规定的限度内；经加速试验6个月及长期试验12个月观察样品,与0月相比各项指标均一致。本文通过SWP抗四氯化碳所致大鼠肝纤维化的药效学研究,观察SWP对大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)等生化指标和肝组织羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)和胶原含量的影响,并通过肝组织病理切片观察肝脏病理改变。结果显示SWP能显著降低大鼠血清中ALT、AST活性,使肝组织变性明显减轻。本文研究了SWP对小鼠的急性毒性作用。结果：小鼠灌胃给药后2周内无1只小鼠死亡,亦未见明显毒性反应；测得小鼠的最大给药量为60g-kg-1,为成人每日用量的600倍。结果显示,在本实验条件下,十二味穿甲片对受试动物未见明显的急性毒性作用,初步确定十二味穿甲片具有较好的安全性。综上所述,该中药复方制剂十二味穿甲片具有较好的抗人体肝纤维化及早期肝硬化功效。该制剂的研制成功,将会产生良好的经济效益和社会效益,具有广阔的市场应用前景。