胃癌细胞中COX-2调控E-cadherin表达相关机制的研究

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第一部分Cyclooxygenase-2在不同分化程度胃癌细胞中的表达目的:研究发现Cyclooxygenase-2(COX-2)在大多数肿瘤中表达增高,且增高程度与肿瘤的淋巴浸润程度和TNM分期相关,但是COX-2在人胃癌细胞系中表达水平与肿瘤侵袭转移能力、分化程度的关系,目前还不是很清楚。本实验主要选用不同分化程度的胃癌细胞系,检测COX-2在胃癌培养细胞系中基因和蛋白水平的表达情况,探讨COX-2与肿瘤侵袭转移能力及分化程度之间的关系,为后期的实验做准备。方法:应用Western blot和实时荧光定量RT-PCR检测人胃癌细胞系AGS、SGC-7901、BGC-823、MGC-803等COX-2的表达水平。结果:蛋白水平:胃癌细胞中SGC-7901表达最高,AGS次之,BGC-823较少,MGC-803不表达。在基因水平:胃癌细胞AGS表达COX-2最高,SGC-7901次之,BGC-823较少,MGC-803表达最低。结论:COX-2在大部分胃癌细胞系中表达,并且COX-2与肿瘤细胞分化程度密切相关。第二部分胃癌细胞BGC-823中COX-2调控E-cadherin表达相关机制的研究目的研究COX-2低表达的人胃癌细胞BGC-823中COX-2与NF-κB、Snail和E-cadhrin等因子之间表达的关系,探讨COX-2调控E-cadherin表达可能的分子机制。方法应运不同浓度的塞来昔布和PGE2干预人胃癌细胞系BGC-823后,实时荧光定量RT-PCR法检测细胞中COX-2、NF-κB、snail和E-cadherin等因子在mRNA水平的表达情况。结果PGE2干预BGC-823后,实时荧光定量RT-PCR检测时发现NF-κB、Snail随着药物剂量的加大表达增高,E-cadherin则表达降低,干预12h、24h、36h各基因有时间剂量依赖性改变。塞来昔布干预后各基因表达无时间剂量依赖性改变。结论COX-2可能通过其代谢产物PGE2作用于Snail和/或通过激活NF-κB间接作用于Snail,实现对E-cadherin的调控,从而参与胃癌的侵袭转移。
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