目的进一步分离纯化积雪草的抗氧化活性成份,观察积雪草提取物的抗氧化能力；观察积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及对小鼠脾淋巴细胞细胞周期和细胞内游离Ca2+的影响,并对其免疫调节作用机制进行初步探讨。方法1.采用乙醇浸提、极性萃取方法分离得积雪草粗提物,利用Sephadex-LH20凝胶柱层析进一步分离纯化获得积雪草各组份提取物。2.以积雪草各组份提取物抑制1,1-二苯基-2-2苦基苯肼(DPPH·)自由基、羟自由基(OH·)的效应评价其抗氧化能力。3.建立小鼠脾淋巴细胞增殖模型,观察积雪草各组份提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。4.利用流式细胞术观察积雪草提取物D对小鼠脾淋巴细胞细胞周期的影响,应用Fluo-3/AM荧光探针结合流式细胞术分析积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞细胞内游离Ca2+影响。结果1.积雪草粗提物经进一步提取得到积雪草提取物A、B、C、D四个组份,证实提取物D抑制DPPH·、OH·能力最为显著,经初步鉴定提取物D为黄酮类物质。2.观察到仅积雪草提取物D具有抑制由ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖作用。3.积雪草提取物D可降低由ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞细胞内游离Ca2+浓度,且呈量效关系。4.积雪草提取物D能阻滞小鼠脾淋巴细胞进入S期和GE/M期。结论积雪草提取物具有较强抗氧化性,经初步鉴定,活性成份为黄酮类物质,其抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的作用机制可能是通过降低细胞内游离Ca2+浓度,继而抑制脾淋巴细胞进入细胞分裂期而发挥作用。