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目的:明确miR-34a负性调控YY1在氡致BEAS-2B细胞凋亡中的作用,为研究氡致支气管上皮细胞凋亡的分子机制提供基础资料。方法:对BEAS-2B细胞进行常规培养,胰酶消化后接种于Transwell培养皿,12h后将培养皿移至染毒装置中进行氡染毒,氡暴露浓度为20,000Bq/m3,染毒时间30min,连续染毒2次后作为染毒1代(Rn1)。分别染氡5代(Rn5)、10代(Rn10)、15代(Rn15)、20代(Rn20)后,流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测miRNA-34a基因的表达水平,Western blot检测YY1的蛋白表达水平。人工合成人源性miR-34a mimic、miR-34a inhibitor,分别瞬时转入BEAS-2B细胞中,观察对细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bcl-2、PARP-1和Bax表达的影响。生物信息学分析发现转录因子YY1的3’-UTR存在与miR-34a互补结合的位点,且符合miRNA靶基因的条件。在BEAS-2B细胞中分别瞬时转入miR-34a mimic、miR-34a inhibitor,观察YY1表达水平的改变。构建YY1过表达载体和沉默载体,观察对细胞凋亡、Bcl-2、PARP-1和Bax表达的影响。结果:(1)细胞凋亡率随氡染毒剂量的增加而升高,miRNA-34a表达水平随氡染毒剂量的增加而增加,而YY1表达水平随氡染毒剂量的增加而降低;(2)转染miR-34a mimic组细胞凋亡率增加,Bcl-2和PARP-1表达下调,Bax表达上调;(3)转染YY1过表达载体组细胞凋亡率减少,Bcl-2和PARP-1表达上调,Bax表达下调。结论:本次试验结果提示,在氡致支气管上皮细胞凋亡的过程中,mi R-34a通过负性调控YY1的表达,使Bax表达上调,Bcl-2和PARP-1表达下调,从而最终促进细胞的凋亡。但其确切的分子生物学机制还需更多的实验加以证实。