MicroRNA-16逆转上皮性卵巢癌耐药性的动物实验研究

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目的:研究microRNA-16(miRNA-16)对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤顺铂耐药性的逆转作用并初步探讨其逆转作用机制。方法:24只SPF级环境下饲养的BALB/c裸鼠,随机分为四组,每组6只:Ⅰ组给予皮下接种卵巢癌SKOV (3)细胞株,随后应用顺铂治疗,Ⅱ组皮下接种卵巢癌SKOV(3)/DDP顺铂耐药细胞株,并给予顺铂治疗;Ⅲ组接种卵巢癌SKOV (3)/DDP顺铂耐药细胞株,给予顺铂与miRNA-16阴性对照试剂(miR-16Negative)协同治疗;Ⅳ组接种卵巢癌SKOV(3)/DDP顺铂耐药细胞株,给予顺铂与miRNA-16化学修饰模拟物(miR-16Agomir)协同治疗,观察比较四组皮下肿瘤生长情况,种瘤后第35天处死裸鼠,称取肿瘤组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中Bcl-2mRNA表达,免疫组化方法检测各组肿瘤组织中Bc1-2蛋白表达。应用SPSS18.0进行统计学分析,多组间计数资料采用LSD法检验,肿瘤体积比较采用重复测量方差分析,P<0.05为差别有显著性。结果:应用顺铂与miR-16Agomir协同治疗的Ⅳ组裸鼠皮下肿瘤体积明显小于单用顺铂治疗的Ⅱ组及应用顺铂与miR-16Negative协同治疗的Ⅲ组,差异具有显著性,P<0.05;Ⅳ组裸鼠皮下肿瘤组织中Bcl-2mRNA表达水平较其余各组降低,差异具有显著性(P<0.05);其Bc1-2蛋白表达水平亦明显低于其余各组(P<0.05)。结论:miRNA-16可能通过对其靶基因Bc1-2的反向调控作用,逆转裸鼠卵巢癌皮下移植瘤顺铂耐药性。
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