柿子皮中类胡萝卜素化合物的分离鉴定及稳定性研究

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类胡萝卜素作为全球生态系统的一大类色素,它们不仅赋予各种生物美丽的色彩,作为光合作用的辅助色素,类胡萝卜素参与执行光能传递和物质转化、淬灭单线态氧和自由基等重要生理生态功能,而且还能保护生物体免受不利环境因素的伤害,这对于维护生态系统的正常运转意义重大。本论文以提取类胡萝卜素化合物为研究目的,以柿子深加工副产品——柿子皮为研究对象,考察了类胡萝卜素化合物的提取工艺,并对类胡萝卜素提取物进行分离纯化和分析检测,同时进行了柿子皮类胡萝卜素化合物的稳定性研究,为其应用、贮存提供理论依据。 采用溶剂回流萃取柿子皮中类胡萝卜素化合物,分光光度法定量分析柿子皮中类胡萝卜素的提取率;考察影响提取效果的各种因素,如提取剂的类型、原料粒度、料液比、提取温度、提取时间等;通过以上因素实验,了解各因素的影响趋势,寻找影响显著的因素。以柿子皮中类胡萝卜素化合物的提取率为考察指标,进行正交试验,获得最佳提取工艺条件:以丙酮为提取剂,提取料液比为1:20g/mL、提取温度60℃、时间2.5h、2级提取。在该条件下,类胡萝卜素提取率为80.74mg/100g柿皮干粉;并在此条件下进行初步放大试验,结果表明,柿子皮中类胡萝卜素化合物的工业化提取是可行的。 采用薄层层析分析和柱色谱分离的方法对柿子皮中类胡萝卜素类化合物进行分离纯化。薄层层析分析表明,柿子皮类胡萝卜素中主要含有4种组分,其Rf值分别为0.901、0.794、0.378和0.299;通过主要因素试验,确定柱层析的最佳分离条件:硅胶为吸附剂,硅胶用量与类胡萝卜素粗品质量比为20:1,洗脱剂为V石油醚:V丙酮=10:3,洗脱速度3.0mL/min。在此条件下分离粗产品,通过薄层层析跟踪,紫外光谱检测,分离出4种化合物,与薄层分析结果一致;通过颜色反应、Rf测定、紫外光谱、高效液相色谱、红外光谱和核磁共振氢谱对各化合物进行分析鉴定,同时以标准品的紫外光谱、Rf、HPLC为对照,证实了分离出的4种化合物分别为β-胡萝卜素、番茄红素、玉米黄质和叶黄素。 最后研究多种因素对柿子皮类胡萝卜素化合物稳定性的影响,研究结果表明:光、热、介质、氧等因素对类胡萝卜素化合物影响较大;糖、维生素C、食盐等常见食品添加剂对类胡萝卜素化合物具有保护作用;类胡萝卜素化合物对Mg2+、Ca2+、Zn2+、Sn2+、K+等离子较稳定,Fe3+、Fe2+、Al3+、Cu2+、I-对其具有很大的破坏作用,不同程度的促进了类胡萝卜素的分解。这些性质的研究为柿子皮类胡萝卜素化合物的贮藏、运输、开发应用提供理论及实验依据。
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