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幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种生长于胃粘膜层的革兰氏阴性细菌,是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素,也是胃癌的主要诱发因子。世界卫生组织已将其列为I类致癌因子。目前,对于该疾病的治疗仍然缺乏有效的药物,筛选具有抑制幽门螺旋杆菌的候选化合物,对于开发治疗胃炎等胃肠道疾病药物具有重要意义。本研究在发现产细菌素菌株具有抑制Hp作用的基础上,对其活性成分细菌素进行了以抗Hp为导向的提取、分离与纯化,结构鉴定,含量测定以及体外拮抗Hp活性评价及其抑菌机理等研究,获得如下研究结果:1、从45株产细菌素的菌株中筛选出5株具有抑制Hp的菌株,优选发现菌株编号为PC-5的菌株活性较强,形态特征观察和生理生化鉴定试验结果表明,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。2、菌株PC-5产细菌素的最佳种子培养条件:培养基为葡萄糖5g/L、酵母膏10g/L、MgSO4 0.5g/L、pH7.0、培养温度37℃、接种量3%(V/V)、培养时间24h、摇床转数150r/min。最佳发酵培养条件:发酵培养基为葡萄糖5g/L、酵母膏10g/L、MgSO4 0.5g/L、pH7.0、培养温度35℃、接种量4%(V/V)、转数150 r/min,罐压0.06MPa,通气量25L/min。3、采用大孔吸附树脂、有机溶剂萃取和硅胶柱层析等方法,分离得到单体成分A-Ⅲ,经有机波谱分析和理化性质测定,成分A-Ⅲ为2个氨基酸与1个不饱和羟基脂肪酸组成的一种新型环脂肽细菌素。4、建立了反相高效液相色谱法测定发酵液中A-Ⅲ含量的方法,色谱条件为:色谱柱:Hypersil C18柱;(150 mm×4.6 mm,5μm);检测波长:203nm;流动相:甲醇-水(73:27);流速:1mL/min;柱温:室温。结果显示,A-Ⅲ在1.44μg～3.24μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=2×106X-891076,(r=0.9994)。该方法简便、可靠,适于A-Ⅲ成分的含量测定和质量控制。5、体外拮抗Hp的结果显示,A-Ⅲ能很好的抑制Hp,主要是通过改变细胞形态致使细菌失活。