论文部分内容阅读
目的本实验以东莨菪碱、亚硝酸钠和乙醇分别致小鼠获得性、巩固性和再现性记忆障碍模型,采用跳台实验观察涤痰汤对学习记忆三个环节的影响,并检测乙酰胆碱酯酶、单胺类神经递质多巴胺以及大脑神经细胞凋亡率。探讨涤痰汤改善记忆功能的作用环节和作用途径,为涤痰汤改善学习记忆障碍提供科学依据。方法昆明种小鼠7 2只,雄性,随机分为3组,即正常组(A组)、模型组(B组)、涤痰汤组(C组),每组24只。分别以生理盐水(A组)、生理盐水(B组)、涤痰汤(C组)灌胃,每日1次,共3周。各组小鼠用跳台法训练并检测学习记忆能力,采用流式细胞仪法检测小鼠大脑神经细胞凋亡率、免疫组织化学法检测皮质区AchE表达、高效液相色谱法测定大脑内多巴胺含量。结果1.跳台实验表明:1.1对学习记忆获得障碍的影响模型组在训练与测试过程中,错误次数都较正常组明显增加,潜伏期较正常组明显缩短,且差异显著(P<0.01),表明记忆获得障碍模型的制作是成功的。涤痰汤组的训练成绩与测试成绩皆显著好于模型组(P<0.01),而与正常组相比,涤痰汤组的训练成绩具有差异显著性(P<0.05),测试成绩与之无差异。说明涤痰汤对小鼠记忆获得障碍模型有显著的改善作用。1.2对学习记忆巩固障碍的影响在未造模时,涤痰汤组的训练成绩明显好于模型组及正常组(P<0.05),正常组和模型组两组训练成绩相比较,无差异(P>0.05),表明涤痰汤对记忆减退有预防作用。与正常组相比较,模型组和涤痰汤组测试成绩错误次数明显增多、潜伏期缩短,有显著差异(P<0.01),表明记忆巩固障碍模型建立成功,涤痰汤组的测试成绩好于模型组(P<0.05),表明涤痰汤对亚硝酸钠所造成的记忆巩固障碍有抑制作用。1.3对学习记忆再现障碍的影响未造模时,涤痰汤组训练成绩明显好于模型组及正常组(P<0.05),同组比较,正常组训练与测试成绩两者没有差异,但模型组训练成绩明显好于测试成绩,有显著性差异(P<0.01),表明造模后,模型组小鼠记忆再现发生了障碍,说明模型是成功的。而造模后,涤痰汤组测试成绩明显好于模型组,与正常组相比较,无显著差异(P<0.01);说明涤痰汤对记忆再现障碍有明显的改善作用。2.流式细胞仪法检测小鼠大脑神经细胞凋亡率的实验表明:正常组神经细胞凋亡率为1.189±0.889%。模型组神经细胞凋亡率明显增高为3.986±1.195%,与正常组比较有显著性差异(P<0.01),表明记忆障碍模型是成功的;涤痰汤组神经细胞凋亡率为1.659±1.078%,较模型组下降,有显著性差异(P<0.01),与正常组相比较,无明显性差异(P>0.05),说明涤痰汤有明显抑制小鼠脑内神经细胞凋亡的作用,表现为凋亡细胞数减少、细胞凋亡率降低。3.对AchE的影响与正常组比较,模型组神经元胞膜及胞浆明显黄染加深,提示模型组AchE表达量增高;而涤痰汤组神经元胞膜及胞浆黄染较模型组明显变浅,较正常组颜色稍深,表明涤痰汤组的AchE表达显著降低。经图像分析测定,模型组较正常组的积分光密度明显增加,有显著差异(P<0.01);而涤痰汤组积分光密度降低,与模型组相比较,有明显差异(P<0.05),表明涤痰汤组可使AchE的表达明显降低。4.高效液相色谱法测定多巴胺含量的实验表明模型组小鼠脑中DA含量明显降低,与正常组小鼠相比较有显著性差异(P<0.01);而涤痰汤可以明显抑制DA含量的下降,与模型组相比较有差异,(P<0.05),而与正常组相比较,差异不明显。结论1.东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇分别对记忆的三个环节进行阻断所致的记忆障碍动物模型,记忆损害确实、损害环节明确、造模方法简单,较好的模拟了记忆减退的特点,是一种成熟可靠的记忆障碍模型。2.涤痰汤可显著改善记忆障碍模型小鼠的学习记忆获得、再现障碍;对记忆巩固障碍稍有改善。3.涤痰汤可通过提高脑组织中多巴胺的含量、降低皮质区AchE的表达、抑制大脑神经细胞的凋亡,对学习记忆起到预防和改善作用。4.中医“痰”的理论与记忆的发生、发展有密切关系,化痰宣窍法是预防和改善记忆减退的基本治法。