帕金森病（Parkinson disease,PD）是中老年人常见的一种神经退行性疾病,平均发病年龄60岁左右,且PD的增长速度在神经系统疾病中位居第一。在全球老龄化社会到来的今天,这一疾病的治疗具有极大的需求,其研究具有十分突出的现实紧迫性。PD对患者生活质量带来严重影响,其症状不仅有运动障碍,也有非运动症状。近年来,随着PD动物模型的构建和应用,PD研究取得了突破性的进展。但目前为止,PD的病因和发病机制尚未完全解析。PD的建模目前主要有神经毒素诱导模型、转基因模型以及二者相结合的模型。1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）是典型的PD造模剂,以MPTP药物诱导建立的PD动物模型可以显示出PD多巴胺能神经元退化以及相应的运动障碍等特点。PARK2基因编码一种E3泛素蛋白连接酶,该基因突变会导致蛋白降解受阻使蛋白聚集从而产生神经毒性,是最常见的导致隐性遗传PD和早发型PD的原因。用不同物种构建更多帕金森病动物模型有助于解释疾病的发病机制,并对筛选PD治疗药物具有潜在重要意义。本研究用MPTP添食诱导和基因编辑方法敲除Bm PARK2创建PD的家蚕模型,用左旋多巴对此模型进行评估,最后利用所创建的PD模型检试了枸杞多糖对PD的治疗效果,初步探讨其能否作为治疗PD的候选药物。已取得的主要研究结果如下:1.创建PD家蚕模型通过测定细胞活力及个体体重,发现125μM MPTP对Bm N细胞和家蚕个体的毒害作用较小。添食125μM MPTP后,昆虫行为记录仪测定结果显示家蚕的运动能力降低,通过高效液相测定DA水平发现DA含量显著降低,通过测定家蚕幼虫抗氧化酶活性的变化发现氧化损伤明显升高,通过免疫荧光发现脑部多巴胺能神经元分子标记酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）表达显著降低,表明多巴胺能神经元受到损伤,这些特征与人类PD患者临床症状类似,表明已成功建立PD家蚕模型。利用CRISPR/Cas9基因编辑方法获得Bm PARK2基因敲除家蚕阳性个体,目前正在纯合体筛选。2.用左旋多巴检试PD家蚕模型细胞毒性测定结果显示,左旋多巴和卡比多巴的混合液对Bm N细胞无明显毒害作用。添食左旋多巴混合液后,MPTP诱导帕金森病家蚕的运动能力和DA水平显著提高,减缓了PD家蚕的氧化损伤,但是TH活性和蛋白表达水平没有明显变化,表明多巴胺能神经元损伤没有被回复,说明左旋多巴混合液只是作为多巴胺前体物质补充PD家蚕内源性DA的不足,不能逆转多巴胺能神经元损伤,该研究结果与其他PD动物模型结果一致,说明可用此模型进行初步的药物筛选。3.利用PD家蚕模型检试枸杞多糖的功效添食枸杞多糖后,虽然PD家蚕的TH表达量无明显变化,但其运动能力、DA水平和TH活性均被显著提高,同时减缓了氧化损伤,推测枸杞多糖可以延缓PD的进程。本研究以家蚕为实验动物,通过长期添食MPTP后测定家蚕运动能力、氧化损伤程度、DA含量变化以及多巴胺能神经元损伤情况等,成功构建PD家蚕模型,利用左旋多巴对此模型进行疗效评估,表明该模型可用于初步药物筛选,最后用此模型探索枸杞多糖的功效,初步发现枸杞多糖对PD具有一定的治疗效果。