【摘 要】
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目的:探究纳米脂肪细胞层中细胞的数量、组分及活性,通过与SVF细胞进行对比,观察两者的差异。方法:将吸脂后所得脂肪随机分为纳米脂肪组及SVF组两组,其中纳米脂肪组细胞悬液制备方式如下:吸脂后脂肪20mL静置30min,使用标准鲁尔接头(内径4.2mm)连接两个10mL注射器,将脂肪进行反复推挤30次,1200g离心3min,使用0.25%Ⅰ型胶原酶消化脂肪组织,提取其中细胞成分,制备成细胞悬液,S
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目的:探究纳米脂肪细胞层中细胞的数量、组分及活性,通过与SVF细胞进行对比,观察两者的差异。方法:将吸脂后所得脂肪随机分为纳米脂肪组及SVF组两组,其中纳米脂肪组细胞悬液制备方式如下:吸脂后脂肪20mL静置30min,使用标准鲁尔接头(内径4.2mm)连接两个10mL注射器,将脂肪进行反复推挤30次,1200g离心3min,使用0.25%Ⅰ型胶原酶消化脂肪组织,提取其中细胞成分,制备成细胞悬液,SVF细胞组的细胞悬液制备直接使用0.25%Ⅰ型胶原酶消化20mL脂肪组织后提取其中细胞成分,制备成SVF细胞悬液。两者进行数量及成分对比,同时将两组细胞于体外培养,取不同培养天数细胞行流式细胞检测表面标志物、油红O及HE染色。结果:纳米脂肪组及SVF组中细胞总数平均分别为1.85±0.73 × 1 06个/mL及5.57±2.63 × 1 06个/mL,两者之间有明显统计学差异(P<0.05)。采用流式细胞检测仪对新鲜制备的纳米脂肪组及SVF细胞组的细胞成分进行分析,可见脂肪来源干细胞(CD34+CD31-CD45-)所占的比例分别为 19.92±5.7%及 30.7±8.7%(P<0.05),血源性细胞(CD45+)所占的比例分别为15.5±8.5%及45.7±10.5%(P<0.05),内皮细胞(CD34+CD31+CD45-)所占的比例分别为 50.93±10.6%及 1.94±0.6%(P<0.05)。此三种细胞组分间具有明显统计学差异。两组细胞进行培养后,虽然纳米脂肪组获取的细胞数目较少,但是两者在体外的增殖、分化趋势一致,随培养时间增加,脂肪来源干细胞均逐渐成为优势细胞,同时逐渐向脂肪细胞分化。结论:纳米脂肪细胞层中的细胞数量明显较同体积脂肪组织中提取得到的SVF细胞数量少,约为其三分之一,同时脂肪来源干细胞比例也偏低,但其中内皮细胞比例明显高于SVF细胞中的内皮细胞比例。通过体外培养后可见两组细胞的增殖、分化情况相似,细胞数量均随培养时间的增长而增多,同时脂肪来源干细胞逐渐成为优势细胞,且出现细胞内成脂。
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