蚕沙叶绿素过渡金属配合物的制备及其与DNA的相互作用

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卟啉及金属卟啉与DNA具有很强的结合作用,同时具有经光照射后能迅速杀死癌细胞的光动力学效应,如血卟啉(Photofrin)因其良好的光动力治疗活性而获得了实际的临床应用,因而卟啉类化合物被当作DNA靶向模型化合物而广泛研究。叶绿素属于镁卟啉类化合物广泛存在于自然界中,在绿色植物的光合作用中起捕获与转移光能的作用。有研究表明叶绿素衍生物有可能成为新一代近红外光敏剂,基于以上结论本文研究了叶绿素与DNA的相互作用,并做了以下几个方面的工作:1.以蚕沙为原料提取出叶绿素,但由于叶绿素本身不稳定而其过渡金属配合物则相对比较稳定,故而把叶绿素制备成叶绿素锌和铜配合物,并采用紫外光谱和质谱对其进行了表征。2.采用琼脂糖凝胶电泳实验,研究了蚕沙叶绿素锌和铜配合物在白炽灯光照下对pBR 322 DNA的切割作用,结果表明锌叶绿素断裂DNA的最佳浓度范围为343.2-457.6μmol/L,在此范围内DNA几乎被完全断裂;铜叶绿素铜叶绿素光断裂pBR 322 DNA的最佳浓度范围为178.5-357μmol/L,在此范围内Form I型DNA几乎全部被断裂为FormⅡ型和FormⅢ型DNA。从浓度上看,铜叶绿素使DNA断裂所需的浓度比锌叶绿素的要小,但是从断裂效果看,锌叶绿素比铜叶绿素的要好。3.采用紫外-可见光谱、荧光光谱、CD光谱和粘度法,研究了蚕沙叶绿素锌配合物与ct-DNA的相互作用模式,实验结果表明锌叶绿素以外部结合模式与DNA相互作用;采用紫外可见光谱、CD光谱和粘度法研究了铜叶绿素与DNA的相互作用,结果显示铜叶绿素也是通过外部结合模式与DNA相互作用。
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