淋巴瘤是起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病。研究发现,雄黄能够抑制多种肿瘤细胞,尤其对白血病的治疗效果更为显著,但临床上存在雄黄使用剂量大,生物利用度低的缺点。雄黄用于淋巴瘤的临床治疗研究也屡见报导,但对其作用机制的研究目前还处于起步阶段。目的我们在前期研究发现,纳米雄黄在细胞水平对B细胞淋巴瘤Raji细胞具有较强的抑制作用,且用药剂量明显低于水飞雄黄,但研究机制不深入,本研究以相同剂量的水飞雄黄为对照,旨在前期研究基础上进一步探讨纳米雄黄引起Raji细胞凋亡和自噬的分子作用机制,为纳米雄黄治疗淋巴瘤的临床应用提供理论研究基础。方法本实验将细胞设为空白组和给药组（给药组分为水飞雄黄组和纳米雄黄组）,利用光学显微镜来观察水飞雄黄和纳米雄黄作用下Raji细胞的生长情况;采用CCK-8实验进行细胞活力检测;利用荧光显微镜来观察Raji细胞形态及细胞核的变化;流式细胞术检测Raji细胞的凋亡情况以及利用Western blot实验从分子生物学的角度来研究Raji细胞的凋亡和自噬。结果从CCK-8实验结果可知,与空白组相比,用浓度为1μg·m L^-1和5μg·m L^-1的水飞雄黄和纳米雄黄药物作用Raji细胞24 h,Raji细胞的增殖能力均受到抑制,且抑制作用呈浓度依赖性,5μg·m L^-1纳米雄黄组的抑制作用更为显著。荧光显微镜结果显示,空白组Raji细胞呈圆形;与空白组相比,水飞雄黄组的Raji细胞在数量上与空白组区别不大,细胞核变化不明显;纳米雄黄组作用的Raji细胞相比于空白组和水飞雄黄组,细胞增殖受到抑制,细胞数量减少,细胞核发生皱缩现象,细胞核中部呈明显的高亮状态,随着药物浓度的增大,细胞增殖受到的抑制越强,细胞核中部高亮越明显。流式细胞术结果显示,水飞雄黄和纳米雄黄药物均会诱导Raji细胞发生凋亡现象,其诱导凋亡的能力呈现浓度依赖性,在药物作用时间为24 h的情况下,用浓度为1μg·m L^-1的雄黄处理Raji细胞,水飞雄黄组作用的Raji细胞的总凋亡率为6.7%,纳米雄黄组作用的Raji细胞的总凋亡率为8.6%;用浓度为5μg·m L^-1雄黄处理Raji细胞,水飞雄黄组作用的Raji细胞的总凋亡率为7.5%,纳米雄黄组作用的Raji细胞的总凋亡率为22.6%;空白组细胞的总凋亡率为5.0%（纳米雄黄组vs.水飞雄黄组,P≤0.01）。Western blot实验结果表明,水飞雄黄和纳米雄黄药物处理Raji细胞24 h后,参考空白组,随着药物浓度的增加,促凋亡蛋白Bax的表达呈逐渐升高的趋势,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达呈逐渐降低的趋势;与空白组相比,自噬相关蛋白Beclin1的表达含量随药物浓度的增加逐步上升,而P62蛋白的表达与之呈现相反的趋势。结论纳米雄黄对Raji细胞的增殖具有抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;纳米雄黄能够诱导Raji细胞发生凋亡,其作用机制可能是通过线粒体途径来实现的;同时,纳米雄黄还能通过上调Beclin-1蛋白表达,下调P62蛋白表达来诱导Raji细胞发生自噬。