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目的:探讨马里苷(Marine)作为聚(ADP-核糖)聚合酶-1(Poly(ADP-ribose)Polymerase,PARP1)抑制剂增强人源结肠癌细胞HCT116及鼠源结肠癌细胞MC38对辐照的敏感性。方法:(1)用MTT法检测经不同浓度马里苷(Marein,5、10、20μΜ)预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116及MC38细胞增殖能力的影响,检测马里苷10μΜ预处理24h后暴露于不同剂量X线(2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)的HCT116及MC38细胞的增殖能力的影响;(2)克隆集落实验检测马里苷10μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy下HCT116及MC38细胞的集落形成能力的影响。(3)Western Blot检测马里苷10μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116及MC38细胞PARP1核糖基化产物即聚(ADP核糖)聚合物(Poly ADP-ribose,PAR)链形成的影响,PARP1捕获能力,DNA损伤标志物γ-H2AX及细胞凋亡标志物Cleaved-PARP的表达水平。(4)免疫荧光检测马里苷10μΜ和Olaparib 10μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116细胞的γ-H2AX的核阳性数。结果:(1)MTT结果显示,经不同浓度马里苷(5μΜ、10μΜ、20μΜ)预处理24h后暴露于X线6Gy的MC38细胞增殖能力明显下降,并呈一定马里苷浓度依赖性(均P<0.01),而马里苷5μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116细胞增殖能力无明显下降(P>0.05),但马里苷10μΜ、20μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116细胞增值能力亦下降明显(P<0.01);经马里苷10μΜ预处理24h后暴露于不同剂量X线(2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)的HCT116和MC38细胞的增殖能力明显下降(均P<0.05);(2)克隆集落实验结果显示:经马里苷10μΜ预处理24h后暴露于X线6Gy的HCT116和MC38细胞克隆集落能力明显下降(均P<0.05)。(3)Western Blot结果显示:在空白对照组HCT116或MC38细胞中PAR链水平比较低,X线6Gy辐照后明显诱导了PAR链的形成,马里苷10μΜ预处理24h可以明显抑制PAR链的形成,并从时间梯度角度(辐照后15min,30min,45min)探讨了辐照诱导PAR链形成的时间及马里苷发挥抑制作用的时间,两种细胞有所差别。结直肠癌细胞HCT116及MC38辐照后,马里苷在较短的时间内明显地捕获PARP1在染色质周围。马里苷明显增加了辐照后诱导的γ-H2AX的表达及Cleaved-PARP的产生。(4)免疫荧光实验显示:马里苷10μΜ和Olaparib 10μΜ都明显地增加了辐照诱导的γ-H2AX核阳性HCT116细胞数目。结论:(1)传统中草药雪菊中的马里苷是一种潜在的PARP1抑制剂。(2)马里苷可以抑制结直肠癌细胞PARP1蛋白核糖基化产物PAR的形成;可以捕获PARP1在染色质周围形成PARP-DNA复合物而发挥PARP1抑制作用。(3)马里苷没有抑癌作用,但可以抑制PARP1增强结直肠癌细胞辐照敏感性,无论在人源结直肠癌细胞,还是鼠源结直肠癌细胞,都能发挥辐照增敏作用。