第一部分，IL-1α不同功能亚型表达系统的构建　　目的：IL-1α为IL-1家族的主要成员，它在炎症与肿瘤发生中都可能发挥重要的作用。然而，其免疫调节作用及机制还不十分明确。有研究发现IL-1α前体可以入核，但其具体的功能机制并不清楚；另有研究表明，膜型IL-1α可能促进了免疫细胞的迁移和激活，而肝细胞坏死后释放的IL-1α则激发了过度的炎症反应并促进了肿瘤的发生。为了能够研究不同功能亚型的IL-1α在炎症与肿瘤发生中的作用，本课题将构建体内实验与体外实验所需要的方法学平台，为进一步研究入核型、膜型和释放的IL-1α与炎症及肿瘤发生反应的关系提供研究基础。　　方法：利用PCR的方法克隆IL-1α不同亚型，经过连接到T载体测序正确后，利用不同限制性内切酶组合切割成不同接头的片段，连接到pCDNA3.1真核表达载体，minicircle真核表达载体，pDsRed真核表达载体，pET30b原核表达载体。形成分别用于体内活体成像的表达系统，用于原位定位的表达系统，以及用于制备IL-1α入核型多克隆抗体的抗原原核表达系统。最终通过水流动力学在小鼠肝脏内表达，分别利用活体成像技术，组织切片及激光扫描细胞仪来检测体内表达情况。　　结果：分别克隆IL-1α基因的不同亚型片段，连接至不同的表达载体。活体成像表达系统可以借助水流动力学高压注射的方法在小鼠肝脏内表达IL-1α亚型，并且通过活体成像检测萤火虫素酶产生的信号来监控和检测IL-1α的表达。在原位定位表达系统中，将小鼠肝脏制作冰冻切片，利用激光扫描细胞仪检测其荧光信号。原核表达系统中，使用IPTG诱导能实现大量IL-1α入核型融合蛋白的优势表达。　　结论：经过一系列分子克隆操作，成功构建了IL-1α不同功能亚型用于活体成像的真核表达系统和用于原位定位表达检测的真核表达系统，以及用于IL-1α入核型多克隆抗体制备的原核表达系统。为后续体内与体外表达和功能实验，以及抗体检测奠定了基础。　　第二部分，IL-1α不同功能亚型在急性淋巴细胞白血病细胞系中的生物学功能　　目的：研究在急性淋巴细胞白血病细胞系过表达IL-1α不同亚型对细胞增殖，细胞周期，细胞凋亡的影响。以及在外界胁迫下过表达野生型、膜型和入核型IL-1α对细胞功能的影响。　　方法：在人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞系中过表达IL-1α不同功能亚型。利用MTT的方法检测不同亚型对细胞增殖的影响。利用7AAD对细胞核进行染色检测IL-1α不同亚型对细胞周期的影响，使用annexin V与7AAD双染的方法检测IL-1α不同亚型对细胞凋亡的影响。以及在外界低血清胁迫下过表达野生型、膜型和入核型IL-1α对细胞功能的影响。　　结果：膜型与入核型IL-1α能够促进细胞增殖。入核型 IL-1α较对照有更多细胞阻滞在G2期，并且能够明显降低细胞凋亡，并具有抗.外界胁迫的功能。　　结论：膜型与入核型IL-1α能够促进细胞增殖，入核型 IL-1α能够抑制细胞凋亡，抵抗外界胁迫。