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目的研究姜黄素对高糖诱导下的视网膜色素上皮细胞发生氧化损伤的保护作用及发生纤维化的抑制作用并探讨其发生机制。方法取人视网膜色素上皮细胞株(hRPE)进行细胞培养,分组方式为:(1)正常培养组(完全培养基);(2)高糖培养组(完全培养基+葡萄糖25mmol/L);(3)-(6)为高糖加药组,在高糖培养的基础上加入姜黄素,其浓度分别设置为5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml。1、应用MTT试验,检测细胞的增殖情况。2、活性氧簇(Reactive Oxygen Species,ROS)试剂盒,检测各组细胞ROS的表达量。3、应用免疫荧光法,检测细胞内核转录因子-κB-p65(Nuclear Factor-kappa B-p65,NF-κB-p65)的表达位置和表达含量。4、酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒,检测肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor–alpha,TNF-α)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达量。5、细胞划痕实验,检测细胞的形态和迁移改变。6、Western-blot技术,检测细胞核转录因子-κB-p65(Nuclear Factor-kappa B-p65,NF-κB-p65),细胞间黏附因子-1(Intercellular Cell Adhesion Molecule,ICAM-1),血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF),转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-beta 1,TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(alpha-Smooth Muscle Actin,α-SMA)和基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)的表达。结果1、与正常细胞组相比,高糖组细胞的增殖活性下降,各高糖加药组细胞的增殖活性随姜黄素浓度的增加而逐渐增加,其差异具有统计学意义(F=25.468,P<0.05)。2、高糖组细胞中ROS的表达含量明显多于正常组;各高糖加药组细胞中ROS的生成量随着姜黄素浓度的增加而明显减少。3、正常组细胞的NF-κB少量表达于胞核中,而高糖组细胞核中的NF-κB大量表达;在各高糖加药组细胞中,随着姜黄素浓度的增加,细胞核中的NF-κB的含量逐渐降低。4、正常细胞的上清液中仅表达少量的TNF-α和IL-1β,高糖组细胞上清液中TNF-α和IL-1β的含量明显增加,其差异具有统计学意义(P<0.05);各高糖加药组细胞上清液中,TNF-α和IL-1β的含量随着姜黄素浓度的增加而下降,且其差异均具有统计学意义(TNF-α,F=28.143,P<0.05;IL-1β,F=17.585,P<0.05)。5、高糖可使视网膜色素上皮细胞发生纤维化,增强细胞的迁移能力;而随着姜黄素浓度的增加,细胞的纤维化和迁移能力逐渐受到抑制。6、Western-blot实验结果显示,与正常组相比,高糖组细胞中NF-κB-p65、ICAM-1、VEGF、TGF-β1、α-SMA、MMP-2的蛋白相对表达含量均增加,差异具有统计学意义(P<0.05);高糖加药组随着姜黄素浓度的不断增加,细胞中各种蛋白的相对表达含量均降低,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1、高糖可以诱导视网膜色素上皮细胞发生氧化损伤。2、高糖可以诱导视网膜色素上皮细胞发生纤维化。3、姜黄素可以通过抑制NF-κB过度活化,抑制高糖诱导下的视网膜色素上皮细胞发生氧化损伤和纤维化,且其作用具有剂量依赖性。