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目的:通过应用Bruker公司的Avance9.4T液态离体型高场强、高分辨率核磁共振频谱仪定量分析亚硒酸钠染毒后,大鼠肝脏急性损伤而发生细胞凋亡时,胆碱复合物的变化。 方法:20只雄性Wistar大鼠随机分成对照及实验两组,每组10只。实验组按20mmol/kg予以亚硒酸钠溶液腹腔注射染毒,对照组仅给予1ml/kg剂量的蒸馏水进行腹腔注射。所有大鼠均牺牲并取得肝脏。1H-MRS数据采集使用离体型9.4T高分辨率核磁共振频谱仪(Bruker Avance400 MHz)。所得频谱在频率域经XWINNMR(Bruker GmBH)软件初步处理后,再应用MestRe-c4.3软件进一步分析。H&E及TUNEL染色被使用来观察和确定肝脏细胞的变化。 结果:质量良好的高氯酸提纯大鼠肝组织物氢质子频谱被获得,常规的肝脏各种水溶性代谢物被探测到并被定位。通过软件积分及公式计算,总胆碱混合物的浓度在对照组是5.08+0.97mmol/L,实验组浓度3.81+1.16;游离胆碱浓度在对照组浓度为1.07+0.23 mmol/L,实验组为0.65+0.20。两组物质在两组间存在统计学意义(p值分别为P<0.05和p<0.01)。但是比较两组间的合成胆碱(主要含有磷酸胆碱及甘油磷酸胆碱)浓度却不存在统计学意义(p>0.05)。HE组织学检测,在100倍光镜下发现实验组的肝窦较对照组的增宽,400倍镜下可见实验组肝脏细胞形态不规则,边界不清,胞浆内可见体积增大,数目增多的类圆型的空泡形成,存留细胞质较浓,浓染的、存留的随意散布的染色质被观及,部分细胞核核仁消失,视野内未见明显的炎症反应。实验组及对照组发生凋亡的肝脏细胞均被TUNEL染色染成棕色而证实。 结论:高剂量、高浓度的亚硒酸钠溶液能导致大鼠肝脏损伤,在活体内引起肝细胞凋亡。离体型高分辨率核磁共振频谱能探测到各种不同的代谢物。在细胞凋亡早期,胆碱混合物的不同成分变化倾向不完全一致。