扁豆DNA提取方法研究

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扁豆(Dolichos Cablab L.)为一年生或多年生植物。本实验以扁豆为材料,对嫩叶、幼果进行基因组DNA提取,试图建立和完善一套高质量DNA提取纯化检测技术体系。该技术的建立和优化将为扁豆植物种质保存、鉴定和评价奠定坚实的基础,也将为植物品种知识产权保护、基因文库构建、分子辅助育种和基因克隆重组、功能鉴定等的分子生物学下游实验提供技术支持。本实验研究的内容是针对影响扁豆DNA提取质量的主要因子进行摸索,以期建立起适宜扁豆DNA提取的优化反应体系。试验设计了四个处理,前三个处理用的是CTAB提取法,处理一是提取扁豆不同品种的DNA的对比,处理二不同CTAB浓度提取DNA的对比,处理三扁豆叶片和果实DNA提取的对比,第四个处理CTAB和SDS两种提取方法的对比。DNA的检测采用琼脂糖凝胶电泳检测和紫外吸收光度法检测两种方法。检测的结果是扁豆不同品种DNA提取中,品种3 DNA质量较好;不同CTAB浓度的对比中,2%CTAB提取缓冲液提取DNA的效果较好;叶片和果实DNA提取中,扁豆叶片提取的DNA质量优于扁豆果实;CTAB和SDS两种提取方法对比,CTAB法提取出的DNA较纯,污染少。DNA提取优化后的结果为2% CTAB法提取的扁豆品种3叶片的DNA质量好,纯度高。
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