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目的:本实验目的是探讨稳定转染并过表达Nrg4的ADSCs((Nrg4-t ADSCs)对肥胖小鼠体内微炎症、糖脂代谢和胰岛素抵抗的影响,并初步探究其相关分子机制。方法:从C57BL/6小鼠腹股沟脂肪中分离培养脂肪干细胞(ADSCs),通过稳转的方式使ADSCs过表达Nrg4,采用CCK8流式等方法检测Nrg4-t ADSCs和ADSCs在细胞存活、凋亡等生物学特性方面的差异以及向骨、脂肪等多向分化能力的差异。实验动物采用C57BL/6小鼠共分为4组:正常饮食对照组(ND组)、高脂饮食对照组(HFD组)、高脂饮食+ADSCs移植组(ADSCs组)、高脂饮食+Nrg4-t ADSCs移植组(Nrg4-t ADSCs组)。细胞移植在高脂饮食后第8周进行,通过尾静脉分别移植ADSCs和Nrg4-t ADSCs。检测移植前后体重、空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、甘油三酯(TC)和胆固醇(TG)含量以及腹腔葡萄糖耐量(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT)。RT-PCR检测小鼠肌肉和脂肪中的Glut4、IL-6和TNF-α表达量;Elisa检测血清中IL-6和TNF-α的浓度;分别在m RNA水平和蛋白水平检测和脂质代谢相关的SREBP-1c和FAS的表达。喂养16W后处死动物收集组织样本,采用HE染色观察组织形态学变化,油红O染色观测肝脏脂肪变情况;免疫组化检测Nrg4蛋白分布情况。结果:三组高脂饮食小鼠体重增加迅速并且出现FPG升高,而在移植ADSCs和Nrg4-t ADSCs后FPG均出现降低(p<0.01),且Nrg4-t ADSCs组FPG低于ADSCs组(p<0.05)。IPGTT和ITT试验显示,三组高脂饮食组小鼠存在糖耐量受损和胰岛素抵抗表现为曲线下面积增加(p<0.01);而在ADSCs和Nrg4-t ADSC组曲线下面积均有所下降(p<0.01),且Nrg4-t ADSCs组曲线下面积小于ADSCs组(p<0.05)。和ND组相比三组高脂饮食小鼠血清中和肝脏中TC、TG含量均明显增高(p<0.01),其中Nrg4-t ADSCs组肝脏和血清中的TC、TG含量低于HFD组和ADSCs组(p<0.01)。三组高脂饮食小鼠血清中IL-6、TNF-α含量均高于ND组(p<0.01),其中ADSC组和Nrg4-t ADSCs组低于HFD组(p<0.05),且两组之间无明显差异(p>0.05)。小鼠肌肉和脂肪组织RT-PCR结果显示,三组高脂饮食组小鼠IL-6、TNF-α在m RNA水平均出现明显上调(p<0.01)而在移植ADSCs和Nrg4-t ADSCs后均出现了下调(p<0.05),且两组之间无明显差异(p>0.05)。组织HE染色显示各组小鼠肌肉和脂肪组织形态学上无明显差异,而高脂饮食组小鼠肝脏中则出现大量的脂肪空泡,并且Nrg4-t ADSCs组空泡数目少于ADSCs组和HFD组(p<0.01)。肝脏油红染色亦发现HFD组和ADSCs存在大量红染脂肪,而Nrg4-t ADSCs组红染脂质较少。免疫组化结果显示在正常小鼠体内未检测到Nrg4,而在Nrg4-t ADSCs组小鼠肝脏细胞膜表面存在大量的Nrg4蛋白。肌肉和脂肪中GLUT4的表达在三组高脂饮食小鼠中均出现了明显的下调(p<0.01),而在移植ADSCs和Nrg4-t ADSCs后肌肉和脂肪中的GLUT4出现了上调(p<0.05)且两组之间无明显差异(p>0.05)。和ND组相比,三组高脂饮食组小鼠肝脏中SREBP-1c和FAS的表达量均出现了上调(p<0.01),其中Nrg4-t ADSCs组小鼠肝脏中SREBP-1c和FAS在蛋白水平和m RNA水平均低于ADSCs组和HFD组(p<0.01)。结论:ADSCs和Nrg4-t ADSCs可以降低FPG水平,减轻胰岛素抵抗,而Nrg4-t ADSCs效果更好;ADSCs和Nrg4-t ADSCs能降低血清中炎性因子含量并抑制肌肉和组织炎症;ADSCs和Nrg4-t ADSCs可以上调肌肉和脂肪中GLUT4的表达,从而增加外周对葡萄糖的摄取;Nrg4能够结合到肝脏细胞膜通过抑制SREBP-1c和FAS的表达来降低肝脏脂质合成。