流式细胞术下观察地塞米松和环孢素对嗜碱粒细胞活化的影响

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背景变态反应性疾病在人群中十分常见,治疗仍然棘手。嗜碱粒细胞作为Ⅰ型变态反应的效应细胞,正逐渐引起人们重视,可能成为治疗变态反应性疾病的重要靶点。现有的方法通过检测细胞介质和细胞因子释放量来观察嗜碱粒细胞活化,操作较困难而且敏感性和特异性也不理想。流式细胞术的发展使体外检测嗜碱粒细胞的活化成为可能,有着方便、快捷、敏感性和特异性均较好的特点。目的在体外建立IgE介导的嗜碱粒细胞活化模型,通过加入不同药物浓度的地塞米松、环孢素和氯苯那敏,观察嗜碱粒细胞表面活化标记表达的变化,探讨药物对体外嗜碱粒细胞活化的作用。方法抽取健康志愿者静脉血,分为不同浓度的地塞米松、环孢素和氯苯那敏处理组,加入不同浓度的药物在37℃预孵育1小时,阴性和阳性对照组均加入等量的PBS并孵育1小时。随后阳性对照组和药物处理组分别加入抗IgE抗体以活化嗜碱粒细胞,阴性对照组加入等量PBS。各组细胞采用CD63 FITC/CD123 PE/HLA-DR PerCP染色标记,通过流式细胞术检测外周血嗜碱粒细胞表面CD63的表达。结果1.阴性对照组嗜碱粒细胞表面CD63阳性百分比为0.70±0.86%,阳性对照组嗜碱粒细胞表面CD63阳性百分比为50.58±9.04%,两者差异有显著性(P<0.01)。2.不同浓度的地塞米松处理组中,嗜碱粒细胞表面CD63阳性表达受到明显抑制,差异有显著性(P<0.01)。药物浓度越高,CD63阳性细胞越少。3.不同浓度的环孢素处理组中,嗜碱粒细胞表面CD63阳性表达均大幅降低,差异有显著性(P<0.01)。不同浓度的环孢素处理组之间,CD63表达没有显著性差异(P>0.05)。4.浓度为10-2M氯苯那敏处理组CD63阳性的细胞百分比降低,与阳性对照相比差异有显著性(P<0.05),浓度为10-3M和10-4M的氯苯那敏处理组CD63阳性细胞和阳性对照组之间无显著性差异(P>0.05)。结论利用流式细胞术建立体外嗜碱粒细胞活化模型是可行的,可以进一步应用于药物筛选和并推测临床疗效。地塞米松和环孢素可以明显抑制体外嗜碱粒细胞的活化。氯苯那敏对体外嗜碱粒细胞活化的抑制作用较弱。
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