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目的:探讨氟达拉滨对大鼠脑缺血再灌注后信号转导子与转录激活子-1(signal transducers and activators of transcription-l,STAT1)和信号转导子与转录激活子-3(signal transducers and activators of transcription-3,STAT3)的影响及MRI改变。
方法:雄性SD大鼠40只,随机分为A假手术组、B缺血模型组、C生理盐水治疗组、D氟达拉滨治疗组。每小组10只。线栓法建立MCAO模型,C、D组于缺血前20分钟分别侧脑室注射等体积生理盐水及氟达拉滨。每组动物均于缺血2h再灌注24h后行弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)、灌注加权成像(perfusion weighted imaging, PWI)、T2WI扫描,取相应部位脑组织行TTC染色、HE染色,采用免疫印迹法(Western blot,WB)检测缺血区STAT1、STAT3蛋白表达及磷酸化水平,并应用TUNEL法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,原位末端转移酶标记技术)检测缺血区域凋亡细胞数量。
结果:MRI表现:假手术组DWI、PWI及T2WI未示异常,B、C、D组可见部分左侧大脑半球DWI呈高信号,ADC值降低,PWI示部分左侧大脑半球灌注缺损,CBV降低,MTT延长。D组DWI异常信号区相对面积、PWI灌注缺损区相对面积、rMTT值较B、C组小(P<0.05),rADC值及rCBV值较B、C组大(P<0.05)。B、C、D组DWI异常信号区及PWI灌注缺损区相对面积差异无统计学意义(P>0.05)。TTC染色:D组失染区面积较B、C组小,与DWI显示异常信号区相对面积无统计学意义(P>0.05)。HE染色:D组神经元坏死程度较B、 C组轻。Western blot半定量:各组STAT1及STAT3蛋白表达无明显差异(P>0.05)。B、C组缺血区域STAT1、STAT3磷酸化水平较A组增加;D组STAT1磷酸化水平较B、C组减少(P<0.05),STAT3磷酸化水平较B、C组增加(P<0.05)。凋亡细胞数量:A组偶见TUNEL阳性细胞,B、C组缺血周边区见较多凋亡细胞,D组缺血周边区脑组织凋亡细胞明显减少(P<0.05)。氟达拉滨于预后P-STAT1表达水平变化与rADC值变化呈负性相关,与DWI异常信号区相对面积变化呈正性相关。P-STAT1与P-STAT3表达水平变化呈负性相关。
结论:(1)脑缺血再灌注损伤早期给予氟达拉滨可以减少缺血周边区凋亡细胞的数目,MRI显示脑梗死范围缩小。(2)应用氟达拉滨后缺血区脑组织磷酸化STAT1减少、磷酸化STAT3相应增加,且两者表达具有相关性。