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本课题组在加工新型果汁--香蕉果汁时发现，绝大多数瓶装果汁在放置超过半年以后，即使是加入了足量的抗氧化剂(维生素C、柠檬酸等)仍然会发生非酶变性，原有的浅橙黄色变为棕褐色；然而有少数杀菌不严、长有某种霉菌样生长物的果汁，能长期保持原有颜色。提示这种霉菌样生长物能分泌某种抗氧化物质，且其抗氧化能力可能相当强大。经初步鉴定这种霉菌样生长物为青霉菌。本课题试图分离、鉴定出分泌强抗氧化物质的青霉菌株；以总抗氧化能力为检测指标，从青霉菌培养物中初步分离、纯化和鉴定其抗氧化组份；并对各个抗氧化组份的清除自由基、抗氧化活性进行初步研究。
目的：
1.分离、鉴定出分泌抗氧化物质的青霉菌株。
2.通过实验确定合适的分泌抗氧化物质青霉菌培养时间。
3.以总抗氧化能力为检测指标，从青霉菌培养物中初步分离、纯化和鉴定其抗氧化物质。
4.对各个抗氧化组份的总抗氧化能力、羟自由基清除能力、超氧化物歧化酶(SOD)进行初步研究。
方法：
1.青霉菌的鉴定和培养：显微镜下初步观察其形态，再将菌株接种于沙氏培养基培养和观察其形态。
2.培养液的浓缩：将菌液进行过滤，石油醚萃取，然后用乙酸乙酯.正丁醇(9:1)萃取，将萃取液减压浓缩至干，残渣以适量甲醇溶解。
3.色谱分析：用硅胶G进行硅胶G薄层层析，用乙酸乙酯：甲醇：水洗脱剂洗脱，再根据薄板层析结果采用硅胶柱色谱等进行分离。
4.脂溶性组份进行气.质联用分析(GC-MS)。
5.萃取后水相进行超滤，截留分子量为小于5KDa和小于10KDa的小分子组份。
6.水相成份Sephadex G-25柱层析分离纯化。
7.水相成份DEAE-CM离子交换柱层析分离纯化。
8.水相成份大孔树脂d101柱层析分离纯化。
9.水相成份大孔树脂DKA柱层析分离纯化。
10.各种分离组份进行总抗氧化能力、羟自由基清除能力、超氧化物歧化酶(SOD)检测。
结论：
分离鉴定出的青霉菌株具有分泌抗氧化物质的能力，邻苯二甲酸类物质以及甲瓦龙酸内酯可能是脂相抗氧化成份。水相抗氧化物质分子量为小于5KDa，Sephadex G-25、DEAE-CM、大孔树脂d101柱层析效果均不够理想，以大孔树脂DKA柱层析分离纯化效果最好。本实验结果为下一步确定青霉菌来源的抗氧化物质的结构奠定了基础。从青霉菌培养液中提取、纯化抗氧化物质，尚未见类似的文献报道。