MMP2、MMP14及IL-6在脊柱结核椎间盘中的表达及其临床意义

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目的:通过测定脊柱结核患者椎间盘中的基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinase-14,MMP-14)及白介素-6(Interleukin-6,IL-6)基因表达水平,研究 MMP-2、MMP-14及IL-6在脊柱结核椎间盘破坏机制中的作用,为脊柱结核的治疗提供一定的理论基础。方法:结核组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因脊柱结核在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。椎间盘突出组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因椎间盘突出在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。正常组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因脊柱椎体骨折在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。椎间盘标本收集后立即放入液氮中保存直至提取组织RNA和组织蛋白。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)技术分别检测各组中椎间盘组织MMP-2、MMP-14的mRNA的表达情况以及各组间的差异,通过Western Blot技术检测各组中椎间盘组织MMP-14蛋白的表达,应用免疫组织化学染色法检测各组中椎间盘组织IL-6的表达情况。同时结合实验室检查与临床问卷调查的方法收集患者相关临床资料,分析MMP-2、MMP-14 mRNA转录水平与脊柱结核患者临床资料直接的病理关系。结果:RT-PCR结果显示与正常组比较MMP-2、MMP-14的表达水平在结核组和椎间盘突出组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),结核组MMP-2表达水平高于椎间盘突出组,差异有统计学意义(P<0.05),结核组MMP-14表达水平高于椎间盘突出组,但差异无统计学意义(P>0.05)。Western Blot结果显示与正常组比较MMP-14表达水平在结核组和椎间盘突出组增加显著,差异有统计学意义(P<0.05)。与椎间盘突出组比较,MMP-14蛋白在结核组的表达量更高,但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色显示结核组、椎间盘突出组IL-6表达水平显著高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),结核组IL-6表达水平高于椎间盘突出组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床资料分析显示结核组MMP-2的表达水平与年龄(P=0.007)、吸烟程度(P=0.004)具有正相关性,与患者性别、工作强度、疼痛程度、血沉、C-反应蛋白、脊柱病变节段以及症状持续时间均无相关性(P>0.05)。MMP-14的表达水平与患者性别、年龄、工作强度、吸烟程度、疼痛程度、脊柱病变节段、症状持续时间、血沉、C-反应蛋白均无相关性(P>0.05)。结论:MMP-2、MMP-14以及IL-6在脊柱结核和退变性椎间盘组织中的表达显著增加,推测MMP-2、MMP-14以及IL-6与结核性椎间盘破坏和椎间盘突出症有关。本研究同时发现结核性椎间盘组织中MMP-2的表达与吸烟程度有正相关性,推测吸烟可能会加剧脊柱结核椎间盘的破坏。
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