脂肪酶具有广泛的底物选择性,以及底物特异性,它可以在温和的条件下反应,耐有机溶剂,而且不会产生过多的副反应,在工业上得到了广泛的运用。但是游离的脂肪酶使用成本高,不易回收,并且酶在生产纯化中也较为复杂。将酶展示在细胞表面的技术很好的解决了这一个问题,展示在细胞表面的酶不需过多的纯化步骤且容易回收利用,而酵母细胞的个体大,展示酶的数量也会相应增多。来源于大肠杆菌的小肽CL7是大肠杆菌素E7（CE7）的无DNAase活性的突变体,与其免疫蛋白7（Im7）间可产生高特异性的强相互作用。脂肪酶K80是一个来源于普通变性杆菌（Proteus sp.）的碱性脂肪酶,在有机溶剂中有较高的水解活性和高稳定性,具有广阔的应用前景。本研究首先在大肠杆菌中实现了融合蛋白CL7-K80的可溶性表达,将纯化后的融合蛋白CL7-K80和融合蛋白CL7-K80在大肠杆菌中表达后的细胞裂解物分别和展示有Im7蛋白的酵母孵育,孵育后的酵母细胞在橄榄油底物平板上检测,在蓝光仪下都可见黄色荧光,表明这两种方式孵育后的酵母细胞都具有水解油脂的活性,即脂肪酶K80成功在酵母上得到了展示,获得了一个具有油脂水解活性的全细胞催化剂。且纯化后的融合蛋白CL7-K80和未纯化的细胞裂解物的展示效率分别为49.8%和44%,二者的展示效率并没有太大差别,且展示后的保留活性分别为8%和7.2%。表明通过未纯化的CL7-K80细胞裂解物与酵母细胞直接孵育是可行的。随后对将游离的脂肪酶K80和展示的脂肪酶K80的酶学性质进行了对比,游离的脂肪酶k80和展示的脂肪酶k80的最适温度为30°C,最适p H为8。展示的脂肪酶K80的热稳定性和p H耐受性较游离的脂肪酶有一定的提高,在40°C中处理0.5 h后,游离的脂肪酶K80的残余酶活已经降至14%,但此时展示的脂肪酶K80还有50%以上的残余酶活。在p H9条件下处理3 h后,游离的脂肪酶k80的残余酶活已经降至30%,而展示的脂肪酶K80的残余酶活还有40%以上。展示后的脂肪酶相对于游离的脂肪酶K80有机溶剂耐受性有了一定提高,当这两种形式的脂肪酶在甲醇中处理3 h后,游离的脂肪酶基本检测不到活性,但是展示后的脂肪酶K80仍然保留了50%的残余酶活。脂肪酶K80在酵母表面的成功展示后,我们又研究了一种来源于嗜盐古菌Halobacteriales archaeoon的一个未知功能蛋白HaPL,我们同样在大肠杆菌中实现了融合蛋白CL7-HaPL的可溶性表达,将融合蛋白CL7-HaPL在大肠杆菌中表达后的细胞裂解物和展示有Im7蛋白的酵母细胞直接孵育,孵育后的酵母细胞在橄榄油底物平板上检测,在蓝光仪下可见黄色荧光,表明孵育后的酵母细胞具有水解油脂的活性。但是融合蛋白CL7-HaPL在大肠杆菌中表达后的细胞裂解物和纯化的融合蛋白CL7-HaPL在橄榄油平板上只能检测到微弱的水解活性,表明这未知功能蛋白是一种潜在的脂肪酶。因此,本研究基于CL7-Im7间高度特异性的强相互作用特性,直接利用表达融合蛋白的大肠杆菌细胞裂解物与展示有Im7的毕赤酵母细胞孵育,无需蛋白质的纯化,简单而快速地实现了脂肪酶在毕赤酵母细胞表面的成功展示,为后续的应用研究奠定了重要基础。