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目的:用12种抗体确定急性髓性白血病（acute myeloid leukemia,AML）白血病相关免疫表型（leukemia-associated immunophenotypes LAIPs）,建立流式细胞术检测急性髓性白血病微小残留病（minimal residual disease,MRD）的方法。方法:选择2005年4月～2006年3月来自山西医科大学第二附属医院、山西省人民医院和山西省儿童医院门诊和住院FAB分型为AML初发患者130例和化疗后患者骨髓标本28份,共158份,首先采用商业用三色抗体组合IgGFITC/IgGPE/CD45ECD,CD34/CD33/CD45,CD19/CD10/CD45,CD14/CD13/CD45,HLA-DR/CD7/CD45,cyMPO/cyCD79a/cyCD3（此组合另加CD45CY5）,进行免疫学分型检测。免疫学确诊AML者采用七组四色荧光标记单克隆抗体组合（IgG1FITC/IgG1PE/CD45Cy5/IgG1ECD、CD34/CD13/CD45/CD19、HLA-DR/CD33/CD45/CD34、CD15/CD11b/CD45/CD34、CD15（或CD11b）/CD117/CD45/CD34、CD34/CD2/CD33/CD45、CD34/CD56/CD33/CD45）,对初发时的AML病人骨髓细胞进行检测,同时对照多份正常骨髓标本的检测结果,将正常骨髓细胞表达率极低或无,白血病细胞上过表达的表型确定为LAIPs。以这些LAIPs对治疗后28份骨髓标本进行监测。结果:初发AML130例有81例（62.31%）,其中非M3AML90例有81例（90%）患者用以上抗体组合可以确定一个以上LAIPs,共确定25种LAIPs。CD11b/CD117/CD45/CD34组合检测频率最高,为72.22%;以下依次为CD15/CD117/CD45/CD34为56.00%,HLA-DR/CD33/CD45/CD34为43.21%,CD34/CD13/CD45/CD19为37.03%,HLA-DR/CD7/CD45为33.33%,CD34/CD56/CD33/CD45为7.50%,CD15/CD11b/CD45/CD34为5.66%和CD34/CD2/CD33/CD45为2.50%。结论:1、用所选组合可以确定25种LAIP,可应用于62.31%AML或90%的非M3AML患者。2、SSC/CD45设门有助于LAIP的确立。3、不同类型AML白血病LAIP具有一定规律,显示明显的阶段特异性和系列特异性。4、治疗中白血病免疫表型转化是白血病细胞诱导后分化发育的结果,变化规律是早期表型细胞减少,后阶段抗原表达的细胞增加。5、免疫表型的转化正是流式检测AML的MRD的优势所在。流式不仅可以准确反映MRD,而且可以准确反映白血病细胞治疗后的转归。6、复发病例可以重新确定LAIP。目的;探讨四色荧光标记单克隆抗体组合（CD15/CD11b/CD33/CD45）监测急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL,又名M3）初始诱导分化治疗效果的意义,以及在微小残留病（minimal residual disease,MRD）检测中的意义。方法;采用一组四色荧光标记单克隆抗体组合（CD15/CD11b/CD33/CD45）,对40例初发时经FAB分型和流式免疫分型诊断为M3的白血病病人及其治疗后12例骨髓标本进行检测,同时检测正常对照8例。结果:在初发M3,以CD45/SSC（侧向角散射）设门,白血病细胞群表达CD15-CD11b-CD33+,此表型确定为M3白血病相关免疫表型（leukemia-associatedimmunophenotype LAIP）。12例在治疗后表达CD15-CD11b-CD33+白血病细胞数量明显降低。而诱导分化后的细胞表达CD15+和/或CD11b+,并逐渐分化为CD15++CD11b++成熟粒细胞。其中CD15-CD11b-CD33+细胞阳性率在9例缓解病例较大SSC的粒细胞群分别为0、0.002%、0.03%、0.08%、0.14%、0.18%、0.25%、0.66%和1.73%,在3例未缓解病例CD45/SSC设门白血病细胞群分别为12.24%、14.76%和45.07%。结论:四色荧光标记单克隆抗体组合（CD15/CD11b/CD33/CD45）,可监测M3诱导分化治疗效果,以及部分较大SSC M3的微小残留病。目的:建立多参数流式细胞术（multiparameter flow cytometry,MFC）检测急性B淋巴细胞白血病（acute B lymphoblastic leukemia,B-ALL）微小残留病（minimal Residual Disease,MRD）的方法,确定B-ALL白血病相关免疫表型（leukemia-associated immunophenotypes,LAIPs）。方法:采用四组四色荧光标记单克隆抗体组合（TdT/CD10/CD19/CD45、CD20/CD10/CD19/CD45、CD34/CD38/CD19/CD45、CD34/CD22/CD19/CD45）,免疫分型时CD13+、CD33+、CD14+病例分别加做CD34/CD13/CD19/CD45、HLA-DR/CD33/CD19/CD45、CD10/CD14/CD19/CD45,检测105份B-ALL骨髓标本（包括60例初诊标本,17例初始诱导治疗后标本,28份为无初始资料随反访标本）,和8例正常骨髓标本。根据对正常骨髓标本和治疗后骨髓标本的检测,确定正常B细胞各分化阶段细胞抗原表达特点,及正常表型。初诊时白血病细胞上出现正常B细胞不表达或极低表达的表型确定为LAIPs。以这些LAIPs对患者诱导治疗结束后的骨髓标本进行监测。结果:应用多参数流式细胞术,本实验确定21种LAIPs,以CD20/CD10/CD19/CD45组合检测频率最高,为60.00%,其中以CD20-CD10++CD19+CD45dim表型最为常见,达25.00%。初诊60例有56例（91.67%）B-ALL患者可以找到适用于MRD检测的LAIPs。并对其中17例患者诱导治疗结束后的骨髓进行MRD检测,12例样本形态学检查原幼细胞低于5%,用流式细胞术检测发现MRD阳性率分别为0.25%、1.2%、0.003%、0.08%、0.06%、0.66%、0.3%、0.08%、0.22%、0.09%、3.6%和0.07%（对于同一病例,以用于监测的各抗体组合中最高的检测数值作为最终结果）。5例样本形态学未缓解,用流式细胞术检测MRD阳性率分别为12.25%、38.2%、7.02%、5.08%和13.06%。该方法的敏感度为10-4,远高于形态学检测法。结论:1、确定了21种LAIPs。2、多参数流式细胞术可以用于91.67%的B-ALL MRD检测。3、B-ALL治疗后骨髓B系原幼细胞较正常骨髓增加,更清楚反映了B细胞分化各阶段细胞,对LAIPs的确定起到了关键的作用。