茶叶中混合污染物的气相色谱-质谱快速筛查方法研究

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茶叶因其独特的口感、优雅的外形和营养健康的养生效果长期受到国内外人们深深的喜爱,成为世界上销量最高的饮品类之一。近年来,茶叶质量安全问题深受世界各地关注。由于茶叶上富含多类污染物,其多元化的基质也会影响污染物检测效果。所以,如何避免这种影响,并且检测到更多污染物的问题有待解决。本文建立了基于气相色谱串联质谱仪(GC-MS/MS)同时测定茶叶中76种混合污染物高通量快速检测方法;建立了基于气相色谱三重四级杆飞行质谱(GC-Q/TOF)以20 min全扫描模式同时分析茶叶中169种混合污染物高分辨快速筛查方法;最后对实际空白样品检测,以确定方法的实用性。取得主要研究结果如下:(1)在气相色谱串联质谱仪(GC-MS/MS)上建立了 20 min内多反应离子检测模式(MRM)仪器方法,其中使用甲基毒死蜱单标建立“保留时间锁定”模式,确保得到最佳数据;在气相色谱三重四级杆飞行质谱(GC-Q/TOF)精确质量污染物个人数据库Pesticide Personal Compound Database and Library(PCDL)中 852 种化合物基础上增加8种多氯联苯污染物用于新建个人PCDL数据库,为筛查实验提供污染物信息基础。(2)本文的QuEChERS前处理方法是以AOAC发布的检测水果蔬菜上常见农药方法为基础,通过优化实验确定新方案:称取2(±0.05)g茶粉,加入10mL纯水涡旋30sec,静置30 min。依次加入10 mL 1%乙酸乙腈、6 g MgSO4、1.5 gCH3COONa-3H2O,剧烈摇晃振荡1 min。于高速冷冻离心机5000 r/min离心5 min。准确转移2.5 mL上清液,加入净化填料涡旋30 sec。再准确转移2 mL溶液,40℃氮吹吹至近干。最后,1 mL乙腈溶解残留物,涡旋30 sec,取上清液通过0.22-μm PTFE过滤膜后待上机检测。(3)GC-MS/MS方法使用新型净化填料EMR-lipid,结果显示,每种待测污染物具有良好的线性关系,并且相关系数γ都大于0.99。样品回收率为70.2%-121.44%,相对标准偏差(RSDs)在0.09%-29.38%范围内。76混合污染物的检测限(LOD)为0.1-5μg/kg,定量限(LOQ)为 0.1-10 μg/kg。(4)GC-Q/TOF方法采用二氧化锆(ZrO2)和N-丙基乙二胺(PSA)净化填料组合。结果显示,回收率大多在80%-120%之间,相对标准偏差(RSDs)大多低20%。充分利用MassHunter定性软件在电子电离EI模式下使用Find by Fragments(FBF)工作流程和精确质量污染物个人数据库 Pesticide Personal Compound Database and Library(PCDL)对169种目标污染物进行验证;未知物分析(UA)和NIST谱库结合用于目标物筛查;使用Mass Profiler Professional(MPP)软件对数据集进行整合用于非目标物筛查。(5)方法有效地应用于实际样品检测。GC-MS/MS上检测到4种污染物:三种多环芳烃和农药三唑磷;GC-Q/TOF上检出多环芳烃和六六六及其代谢物。与传统的分析方法相比,开发的方法在监测茶叶中农药和环境污染物残留方面更有效、更快捷、灵敏度高、实用性强。
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