论文部分内容阅读
目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子联合胰高血糖素样肽-1干预对心肌梗死模型大鼠缺血损伤的作用方法:选取健康清洁级成年雄性SD大鼠50只,体重250-300g,通过结扎冠状动脉左前降支制作大鼠心肌梗死(MI)模型。按照随机数字表法分为SHAM组、MI组、RH组、LI组和RH-LI组各10只。动物型彩色多普勒超声诊断仪分别于术前和术后6周检测大鼠心功能指标,包括左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(FS);6周后深麻醉处死大鼠,伊红素(HE)染色法观察心肌肌纤维化及心肌细胞排列情况。Masson染色法观察各组大鼠心肌胶原分布情况,并计算心肌胶原容积分数(CVF);免疫组织化学染色法检测大鼠心肌组织中缝隙连接蛋白-43(Cx43)表达及分布情况,并进行半定量分析。结果:(1)超声心动图:与SHAM组比较,MI组及各干预组LVEDD增大,LVEF和FS降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。与MI组比较,RH-LI组和LI组LVEDD减小,LVEF和FS升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);RH组,LVEF和FS升高,差异有统计学意义(P<0.05),LVEDD减小,但差异无统计学意义(P>0.05)。各干预组两两比较,RH-LI组LVEDD较LI组和RH组减小,LVEF和FS升高,差异有统计学意义(P均<0.05);LI组和RH组比较,LVEDD减小,LVEF和FS升高,但差异无统计学意义(P均>0.05)。(2)HE染色结果:SHAM组与RH-LI组心肌纤维清晰,排列规则,无明显纤维化;LI组心肌纤维排列尚规则,少部分存在心肌纤维肌浆溶解、纤维断裂,可见少量纤维化;RH组部分心肌纤维排列欠规则,局部存在心肌纤维扭曲肿胀、肌浆溶解,可见少量纤维化;MI组肌纤维排列紊乱、细胞外间隙增宽,心肌纤维扭曲肿胀、肌浆溶解、纤维断裂,纤维化程度明显。(3)Masson染色结果:与MI组[(54.16±9.65)%]比较,RH-LI组[(25.36±5.26)%]、LI组[(35.64±7.71)%]和RH组[(38.28±7.97)%]的CVF均显著减小(P均<0.05)。各干预组间两两比较,RH-LI组CVF均明显小于LI组和RH组,差异有统计学意义(P均<0.01);LI组较RH组CVF减小,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)免疫组化结果:SHAM组Cx43免疫组化阳性颗粒规则排列,呈带状分布于相邻心肌细胞交界处,心肌细胞排列整齐、细致,结构完整,无变性坏死,胞核结构清晰。MI组大鼠心肌细胞特异性染褐分布范围小、染色较浅,表明Cx43表达降低,且Cx43阳性颗粒排列紊乱,多位于心室肌细胞的侧边或胞内,心肌组织边界模糊,损伤严重。与SHAM组比较,MI组Cx43阳性颗粒表达明显降低且排列紊乱。与MI组比较,RH-LI组、LI组和RH组的细胞特异性染色分布范围扩大,Cx43表达不同程度升高,且Cx43阳性颗粒多数分布于相邻心肌细胞交界处,其中以RH-LI组最为明显,其与SHAM组结构近似;对Cx43免疫组化染色进行半定量分析的结果表明,RH-LI组的Cx43平均光密度(OD)值相对于MI组明显升高[(0.413±0.087)vs(0.126±0.017),P<0.01]。LI组与MI组比较[(0.304±0.076)vs(0.126±0.017)]和RH组与MI组比较[(0.282±0.063)vs(0.126±0.017)],Cx43表达水平也存在显著差异(P均<0.05)。通过干预组组间比较发现,RH-LI组与LI组[(0.413±0.087)vs(0.304±0.076)]比较和RH-LI组与RH组[(0.413±0.087)vs(0.282±0.063)]比较,Cx43表达水平均明显升高(P均<0.01);LI组与RH组比较,Cx43表达水平升高,差异有统计学意义[(0.304±0.076)vs(0.282±0.063),P<0.05]结论:RhG-CSF联合GLP-1干预能有效减少MI模型大鼠心肌胶原重构,上调Cx43的表达,改善左室功能,可能通过改善梗死周边心肌细胞的缝隙连接,降低缺血损伤。