泛素-蛋白酶体途径是细胞内最重要的、高效的蛋白降解途径之一。参与体内许多包括细胞周期的调控等生理功能，其中去泛素化酶USP亚家族是目前已知的去泛素化酶中成员最多，且结构最具多样性的一类，亦属半胱氨酸蛋白酶，此家族包含USP1、USP3、USP11和USP28等，能将泛素分子从泛素化的蛋白上移除，消除或逆转泛素化蛋白质的生物学功能。UAF1（USP1-associated factor1）是一个分子量为80kDa的蛋白，其N-端有一段包含有8个WD重复基序的WD40结构域，C-端是螺旋卷曲域，研究发现人的USP1可以与UAF1形成复合体USP1/UAF1，且可提高USP1的活性，此复合体酶可以去泛素化PCNA-Ub和FANCD2-Ub，调节DNA损伤修复过程。 要研究USP1/UAF1蛋白特性及其在细胞生命过程中的生物学功能，特异的鸡UAF1蛋白的抗体是这些研究中的重要工具，因此作者从chUAF1原核表达的细胞总蛋白中提纯出chUAF1蛋白作为抗原，免疫獭兔制备了抗chUAF1蛋白的多克隆抗体。 为获取全长USP1进行USP1/UAF1的活性分析及后期功能研究和USP1与UAF1相互作用的机制，本研究突变了USP1的自剪切位点（GG680,681AA），应用昆虫细胞表达系统对chUSP1GG680,681AA/chUAF1和chUSP1GG680,681AA蛋白进行了表达纯化。获得蛋白纯度均大于85%，每克细胞纯化得到0.2mg目的蛋白。 纯化后的chUSP1GG680,681AA/chUAF1和chUSP1GG680,681AA分别对底物Di-Ub WT （K63）、Di-Ub WT （K48）及Di-SUMO2WT进行酶切，SDS-PAGE电泳及软件分析表明，chUSP1GG680,681AA/chUAF1和chUSP1GG680,681AA都能有效切开三种底物，在本实验条件下，切开Di-Ub WT（K63）的效率分别为81%和77%；对Di-Ub WT（K48）的切割效率分别为99%和51%；对Di-SUMO2WT的切割效率分别为39%和4%，证明chUSP1GG680,681AA/chUAF1复合体活性高于chUSP1GG680,681AA单体，且酶切K48泛素链更有效，但为什么USP1也能切开Di-SUMO2WT，还有待于进一步的研究。 本研究结果表明，鸡UAF1与USP1可以相互作用形成复合体，且可提高USP1的酶活性，这为深入研究二者的相互作用机理及细胞内的功能奠定了基础。