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第一部分mGM-CSF基因修饰性肺癌瘤苗的构建及鉴定目的：以mGM-CSF基因修饰小鼠肺腺癌细胞系LA795构建肿瘤疫苗，并鉴定mGM-CSF的表达水平。方法：利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个mGM-CSF基因和一个EGFP基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM质粒，经EcoRⅠ及BamHⅠ双酶切鉴定并测序。通过脂质体法转染LA795肺腺癌细胞，用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达，用ELISA法检测细胞中mGM-CSF的表达，最后照射灭活制备肺癌瘤苗。结果：构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM，用脂质体法转染LA795肺癌细胞后，经荧光显微镜和ELISA法检测，可见细胞内有EGFP及mGM-CSF的表达，mGM-CSF表达量适合制备肿瘤瘤苗。结论：成功构建真核表达载体plRES2-EGFP-mGM，并在LA795肺癌细胞中表达，转染后的小鼠肺癌细胞能够表达足够功能正常的mGM-CSF蛋白，经照射灭活成功制备mGM-CSF分泌型LA795肺腺癌细胞瘤苗。第二部分mGM-CSF基因修饰性肺癌瘤苗在动物体内作用的初步研究目的：初步探讨mGM-CSF分泌型LA795肺癌瘤苗在动物体内所诱导的非特异性细胞免疫反应及其机制。方法：将构建完成的mGM-CSF分泌型LA795肺癌瘤苗免疫T739小鼠，同时设立无mGM-CSF基因修饰LA795肺癌瘤苗组及PBS对照组，应用流式细胞法检测检测小鼠血清IFN-Y的分泌水平、外周血免疫细胞分布、脾细胞杀伤实验等。结果：mGM-CSF分泌型LA795肺癌瘤苗组免疫小鼠血清中IFN-Y的含量、外周血中CD8~+T的含量高于无mGM-CSF基因修饰LA795肺癌瘤苗组及PBS对照组(P均＜0.01)，其脾细胞的非特异性杀伤能力显著增加，亦远高于其与两组(P＜0.01)。结论：mGM-CSF分泌型LA795肺腺癌细胞瘤苗可诱导自体T细胞向CTL方向增殖分化，CTL的增殖是该瘤苗引起特异性抗瘤免疫的基础，而mGM-CSF的分泌则极大的增强了该瘤苗的免疫效果，此免疫效果主要通过直接活化CD8~+CTL细胞产生。