内皮抑素基因腺病毒载体表达系统治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

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目的:检测内皮抑素基因腺病毒载体表达系统(Ad-mES)体外生物学活性及其治疗小鼠黑色素瘤的效果;初步探讨内皮抑素的抗肿瘤机理。方法:在HEK293细胞内扩增腺病毒,50%组织培养感染剂量法测定其滴度;RT-PCR、Western Blot和ELISA法检测目的基因的表达;MTT法和流式细胞术检测靶细胞的体外生长情况。多因素多水平析因分析法设计测定体内转染率;观察各组小鼠肿瘤的生长、转移和生存率,Western Blot、免疫组化和透射电镜等鉴定组织内目的基因的表达、血管生成和靶细胞的生长。结果:腺病毒的滴度为1010pfu/ml,靶细胞明确表达内皮抑素基因,Ad-mES抑制内皮细胞的增殖;治疗小鼠黑色素瘤时,取瘤内注射和间隔7天给药Ad的体内转染率最高(MOI=500时,37.33%)。治疗组小鼠平均生存时间延长,肿瘤体积增长减慢,肿瘤新生血管生成减少。结论:Ad-mES对小鼠黑色素瘤有较好的治疗效果。
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