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荧光分析是灵敏度高,选择性强,试样量少,仪器简单,快速测定的通用的检测手段,为复杂的样品中微量待测物的分析及含量测定提供了重要手段。MIP的特异选择性使其从复杂样品中吸附目标分子及结构类似物,可用作固相萃取剂选择性分离提取复杂样品中的痕量被分析物。荧光分析法与分子印迹固相微萃取结合使用,提高了方法的灵敏度和选择性。本研究根据荧光分析法,分子印迹技术固相微萃取原理,利用多层共聚合法,制备了一种以吲哚-3-丁酸为模板的分子印迹固相微萃取涂层,测定了绿豆中生长素的含量,及实现了生长素快速测定。并合成了三种生长素硅烷偶联化合物,固定石英表面上,制备固定模板膜。最后通过固定模板印迹聚合法,得到分子印迹纳米聚合物(MIN)。主要内容包括如下:1.分别确定了吲哚-3-乙酸(IAA),吲哚-3-丙酸(IPA),吲哚-3-丁酸(IBA)的荧光激发波长和发射波长,选择pH=9为最佳pH条件;IAA,IPA及IBA的线性范围分别为2-24μg/mL,2-16μg/mL,0.5-32μg/mL;最低检测线(LOD)为0.565,0.426,0.515;最低定量限(LOQ)为1.62,1.29,1.56;为验证此方法的准确性,对实验室自来水进行加标回收实验,回收率在93.06%~108.69%之间,RSD(n=3)为0.26%~2.72%。比较了两种不同萃取方法,液液萃取绿豆生长素,含量为0.68μg/g,样品回收率在99.5%~101.25%之间, RSD(n=3)小于3.6%。用MISPE能够有效富集萃取绿豆中的总生长素,含量为0.96μg/g,样品回收率在90%~100%之间, RSD(n=3)小于4.5%。2.本研究中以IBA为研究对象,通过多层共聚方法制备一种新型的IBA-MIP-SPME涂层。在优化条件下,以MAA为功能单体,EGDMA为交联剂,氯仿为聚合溶剂,pH=2.5磷酸缓冲溶液为吸附溶剂。考察了MIP和NIP涂层在不同浓度的IBA pH=2.5缓冲溶液(10~60mg/L)中萃取能力。IBA-MIP-SPME涂层的萃取量最大吸附量达到16.89mg/L。吲哚-3-乙酸(IAA),吲哚-3-丙酸(IPA),色胺(TA)等结构类似物作为参考化合物,考察MIP和NIP涂层选择性。结果表明,IBA-MIP-SPME涂层对IBA具有高选择性和特异性吸附。IBA-MIP-SPME涂层能够萃取富集绿豆中的总生长素,加标回收率为72.4~83.3%, RSD(n=3)小于7.4%。3.吲哚-3-乙酸(IAA),吲哚-3-丙酸(IPA),吲哚-3-丁酸(IBA)为反应物,在N-N-二环己基碳二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)催化条件下,与3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)进行反应,初步合成了三种不同的固定模板。通过核磁共振(NMR)和红外光谱法(IR)进行结构表征。我们进一步对固定模板膜的紫外和荧光光谱特性进行研究。4.采用第三章制备的基于吲哚-3-丁酸固定模板膜,甲基丙烯酸(MAA)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA),丙烯酸酯(TRIM)为交联剂,四(3-巯基丙酸)季戊四醇酯为链转移剂,N,N-二乙胺基硫代硫乙酸苄酯(inferter)为引发剂,乙腈为聚合溶剂,在UV照射下合成分子印迹纳米颗粒(MIN)。固定模板膜可以重复多次制备IBA-MIN,重复使用5次后仍有相当于初始固定模板40%以上的固定模板可再使用。通过SEM,激光纳米对高亲和力MIN进行表征。通过吸附实验证明模板与MIN相互结合。IBA-MIN富集绿豆中的总生长素,含量为0.46μg/g,加标回收率为88.75%~91%,RSD(n=3)小于3.6%。